Estudio de la heterocromatina constitutiva de Cebus paraguayanus y Cebus nigritus (Primates, Platyrrhini) desde un enfoque citogenético-molecular: micro-FISH y CGH.

NIEVES, MARIELA; MUDRY, MARTA D.; LAUDICINA, ALEJANDRO; MUHLMANN, MARÍA C.

Foz do Iguazú, Brasil

Congreso; 52º Congresso Brasileiro de Genética - 12º Congreso de la Asociación Latinoamericana de Genética; 2006

Sociedad Brasileira de Genética

Los Primates Neotropicales (Platyrrhini) presentan una marcada variabilidad cariotípica a expensas de reordenamientos tanto numéricos como estructurales aun en especies del mismo género. La citogenética (bandas C, G, NOR y FISH) muestra que mientras regiones eucromáticas se hallan conservadas en Platyrrhini, las heterocromáticas son altamente variables en cantidad, distribución y composición. En el género con el cariotipo considerado más ancestral, Cebus (Cebidae), se observa la mayor proporción de heterocromatina constitutiva en cuya constitución coexisten, al menos hasta el presente, dos tipos de ADN repetitivo. Durante los últimos 30 años se discute la posible relación entre heterocromatina y especiación cromosómica y los Primates Neotropicales, en particular Cebus, constituyen un modelo para su análisis. En esta oportunidad se trabajó con la heterocromatina extracentromérica de Cebus paraguayanus (CPA) y Cebus nigritus (CNI) desarrollando por microdisección cromosómica una sonda para FISH de la región heterocromática extracentromérica del cromosoma 11 de Cebus paraguayanus (11q He+), cromosoma marcador de esta especie por estar ausente el bloque heterocromático distal en CNI. Con el objetivo de analizar la posible existencia de diferencias cuantitativas en el ADN a nivel interespecífico se aplicó la técnica de Hibridación Genómica Comparada (CGH) que consiste en hibridar el ADN genómico total de dos especies filogenéticamente cercanas. Ambos genomas, utilizados en cantidades iguales, se marcan con un fluorocromo de color diferente para detectar desbalances cromosómicos numéricos en un solo experimento. El estudio por FISH de metafases de CPA y CNI, aplicando la sonda del CPA 11q He+, mostró entre 6 y 10 marcas por metafase en todos los pares He+ previamente caracterizados por bandas C. Este resultado pone en evidencia que la heterocromatina extracentromérica de ambas especies es la misma, amplificada y distribuida de manera diferencial en cada una. El CGH permitió observar que: 1) La heterocromatina extracentromerica de CPA se encontraría en exceso con respecto a CNI en una proporción aún a determinar. 2) Señales teloméricas y centroméricas en un mismo color, en ambas especies, confirman citogenéticamente la identidad de la heterochromatina de esas regiones. 3) CNI presenta mayor cantidad de ADN en 2 a 8 pares (incluyendo cromosomas enteros y brazos cromosómicos) que no presentan heterocromatina extracentromérica. Por último, la sonda CPA 11qHe+ aplicada sobre metafases de otras 5 especies de Cebus y otros 8 géneros y especies de Platyrrhini, mostró hibridación solamente en las especies de Cebus. Estos hallazgos permitieron proponer una identidad género-específica para la heterocromatina analizada que, en Cebus paraguayanus y Cebus nigritus, podrían estar indicando un proceso especiogénico inclusivo de cambios tanto eucromáticos como heterocromáticos.Cebus (Cebidae), se observa la mayor proporción de heterocromatina constitutiva en cuya constitución coexisten, al menos hasta el presente, dos tipos de ADN repetitivo. Durante los últimos 30 años se discute la posible relación entre heterocromatina y especiación cromosómica y los Primates Neotropicales, en particular Cebus, constituyen un modelo para su análisis. En esta oportunidad se trabajó con la heterocromatina extracentromérica de Cebus paraguayanus (CPA) y Cebus nigritus (CNI) desarrollando por microdisección cromosómica una sonda para FISH de la región heterocromática extracentromérica del cromosoma 11 de Cebus paraguayanus (11q He+), cromosoma marcador de esta especie por estar ausente el bloque heterocromático distal en CNI. Con el objetivo de analizar la posible existencia de diferencias cuantitativas en el ADN a nivel interespecífico se aplicó la técnica de Hibridación Genómica Comparada (CGH) que consiste en hibridar el ADN genómico total de dos especies filogenéticamente cercanas. Ambos genomas, utilizados en cantidades iguales, se marcan con un fluorocromo de color diferente para detectar desbalances cromosómicos numéricos en un solo experimento. El estudio por FISH de metafases de CPA y CNI, aplicando la sonda del CPA 11q He+, mostró entre 6 y 10 marcas por metafase en todos los pares He+ previamente caracterizados por bandas C. Este resultado pone en evidencia que la heterocromatina extracentromérica de ambas especies es la misma, amplificada y distribuida de manera diferencial en cada una. El CGH permitió observar que: 1) La heterocromatina extracentromerica de CPA se encontraría en exceso con respecto a CNI en una proporción aún a determinar. 2) Señales teloméricas y centroméricas en un mismo color, en ambas especies, confirman citogenéticamente la identidad de la heterochromatina de esas regiones. 3) CNI presenta mayor cantidad de ADN en 2 a 8 pares (incluyendo cromosomas enteros y brazos cromosómicos) que no presentan heterocromatina extracentromérica. Por último, la sonda CPA 11qHe+ aplicada sobre metafases de otras 5 especies de Cebus y otros 8 géneros y especies de Platyrrhini, mostró hibridación solamente en las especies de Cebus. Estos hallazgos permitieron proponer una identidad género-específica para la heterocromatina analizada que, en Cebus paraguayanus y Cebus nigritus, podrían estar indicando un proceso especiogénico inclusivo de cambios tanto eucromáticos como heterocromáticos.