AMP cíclico: regulación negativa de la producción de IFN-gamma contra Mycobacterium tuberculosis.

VIRGINIA PASQUINELLI; FLORENCIA QUIROGA; JAVIER JURADO; PETER BARNES; BUKA SAMTEN; VERÓNICA GARCÍA

Mar del Plata, Argentina

Congreso; Congreso de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2006

Sociedad Argentina de Inmunología/Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Ha sido demostrado que el segundo mensajero AMP ciclico (AMPc) es un regulador negativo de la activación de células T.  Las concentraciones elevadas de AMPc inhiben la mitogénesis inducida por varios estímulos, incluyendo alo-antigenos, IL-2 y anticuerpos anti-CD4. Interesantemente, los pacientes con tuberculosis presentan altos niveles de AMPc respecto a dadores sanos, pero no se conoce el rol de este segundo mensajero en la respuesta inmune contra M. tuberculosis. Nosotros encontramos en individuos sanos PPD+ que el tratamiento con forskolina (FSK, activador directo de la adenilato ciclasa) y Bt2cAMP (analogo sintetico de AMPc)  disminuian significativamente la producción de IFN-g inducida por M. tuberculosis (ELISA, p<0.001), independientemente de la concentración. Mas aun, encontramos una disminución significativa de la producción de TNF-a (p<0.05), así como un incremento de la secreción de IL-10. A fin de determinar el mecanismo por el cual este segundo mensajero produce este desbalance en la producción de citoquinas estudiamos la fosforilación de los factores de transcripción CREB y ATF-2, ambos implicados en la regulación de la producción de IFN-g por células T que responden a M. tuberculosis. Para esto, células mononucleares de sangre periférica proveniente de individuos PPD+ fueron estimuladas con M. tuberculosis en presencia/ausencia de FSK o Bt2cAMP, se realizaron extractos nucleares y se determino la expresión total y la fosforilación de CREB y ATF-2 por western blot. Interesantemente, encontramos que el incremento en el AMPc intracelular inhibió la fosforilación de CREB y de ATF-2 inducida por el antígeno, impidiendo así la activación de estos factores de transcripción y posiblemente la unión de los mismos al promotor de IFN-g. Así, se demuestra  por primera vez un rol inhibitorio del AMPc en la generación de respuestas Th1 frente a M. tuberculosis.