Regulación de la producción de IL-17 a través de la váa de señtalización del receptor de muerte programada-1 PD-1 en pacientes con tuberculosis pulmonar activa.

MF QUIROGA; V PASQUINELLI; IB ALVAREZ; JO JURADO; DA FERNANDEZ DO PORTO; A BRANDA; GP DE STEFANO; J CASTAGNINO; RM MUSELLA; E ABBATE; VE GARCIA

CORDOBA-ARGENTINA

Congreso; LVI Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2008

Sociedad Argentina de Inmunolog¨ªa

La inmunidad Th1 es crítica en la inmunidad contra Mycobacterium tuberculosis (Mtb). Las células Th17 producen IL-17, citoquina proinflamatoria que antagoniza al linaje Th1. Como se desconoce actualmente la regulación de la producción de IL-17 durante la tuberculosis (TB) humana, en este trabajo investigamos el rol de la vía PD-1 y sus ligandos, PDL-1 y PDL-2, sobre la modulación de respuestas Th17 contra M. tuberculosis. Células mononucleares de sangre periférica (CMSP) y células de derrame pleural (DP) de pacientes con TB fueron estimuladas con sonicado de Mtb. Se determinó la frecuencia (%) de LTh17 y LTh1 y la expresión de PD-1 en LT y LTh17 por citometria de flujo, y los niveles de IL-17 e IFN-g en sobrenadantes de cultivo por ELISA. Más aún, se cultivaron CMSP en presencia/ausencia de anticuerpos bloqueantes anti-PD-1, PDL-1 y/o PDL-2 para luego determinar los niveles de IL-17 en SN de cultivo mediante ELISA. Observamos que la expresión de PD-1 inducida por Mtb el LT es susceptible a la regulación por IL-17 (Mtb: 100%, Mtb+IL-17:16%+/-6, p<0.05), sugiriendo una relación entre PD-1 e IL-17. Al investigar el % de LT IL-17+ Mtb-específicos en pacientes con TB, observamos que en DP su % fue significativamente menor que en periferia (SP: 7.9%+/- 2.3; DP: 2.9%+/-0.5, p<0.05), indicando que un microambiente Th1 regularía negativamente la población Th17 en TB. Más aún, el bloqueo del IFN-g endógeno en respuesta a Mtb indujo un incremento en la frecuencia de células T IL-17+ (p<0.01), reforzando la idea de una regulación cruzada entre las poblaciones Th1-Th17 en TB. Estudios sobre el fenotipo de LT IL-17+ mostraron una alta expresión en superficie de PD-1 (40%+/-15), mientras que una muy baja proporción de los mismos coexpresaron IFN-g (IL-17: 16.5%+/-5; IFN-g/IL-17: 5.5%+/-2.2; IFN-g: 70.2%+/-.4) mostrando que las poblaciones Th1 y Th17 se excluyen mutuamente en TB. El bloqueo de PD-1, así como de PD-1 en tandem con sus ligandos (PDL-1 y PDL-2) incrementó la producción de IL-17 en respuesta a Mtb (Medio: 58+/-7pg/ml; Mtb: 366+/-61pg/ml; Mtb+PD-1: 684+/-147pg/ml; Mtb+PDLs: 696+/-151pg/ml, p<0.05). Los resultados presentados aportan informacion valiosa para la comprensión de los mecanismos inmunológicos involucrados en el desarrollo de TB, contribuyendo así al desarrollo de herramientas para el control de la infección