INVESTIGADORES
VOTA daiana Marina
congresos y reuniones científicas
Título:
ACCIÓN DE TNF-ALFA SOBRE CÉLULAS EN ETAPA DE DIFERENCIACIÓN ERITROIDE
Autor/es:
VITTORI, DANIELA; PEREZ, GLADYS; VOTA, DAIANA; NESSE, ALCIRA
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; 50 Reunión anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2005
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación Clínica
Resumen:
La producción incrementada de citoquinas inflamatorias cumpliría un rol inhibitorio sobre la supervivencia de progenitores eritroides en la anemia de la enfermedad crónica. Para investigar la apoptosis mediada por receptores de muerte durante el proceso de diferenciación eritroide, se estudió el efecto de TNF-alfa (T) sobre las líneas celulares UT-7 (dependiente de eritropoyetina, E) y K562. En ambas, la diferenciación inducida por hemina (H) alcanzó valores de 86% de células hemoglobinizadas (DAF) y no afectó la viabilidad ni la proliferación celular. El T no indujo apoptosis sobre las células no diferenciadas. El tratamiento con H sensibilizó a las células K562 al efecto apoptótico de T (Hoechst) (H-T 37,6±3,0%; H 4,7± 0,5%; P<0,002), el cual fue incrementado por la inhibición de PI3K con Ly 294002 (H-T-Ly 67,8±2,4%; H-Ly 14,2±6,5%; P <0,05). La acción de T fue confirmada por neutralización con anti-T. En células UT-7 cultivadas con E e inducidas a diferenciación con H, sólo se observó apoptosis debida a T en presencia de Ly, la cual fue significativamente mayor a la debida a la inactivación con de la señalización de E vía PI3K (E-H-Ly.-T 92,2±2,4%; E-H-Ly 68,9±5,3%; P<0,01). Los niveles de ARNm (RT-PCR) del factor antiapoptótico Bcl-x no se modificaron por ninguno de los tratamientos de las líneas celulares. Los niveles de ARNm de c-FLIP, proteína supresora de señales apoptóticas inducidas por receptores de muerte, desminuyeron en células K562 diferenciadas, pero no en UT-7. Como conclusión, Células con distinta dependencia de factores de crecimiento muestran diferente sensibilidad al efecto de citoquinas proinflamatorias bajo las mismas condiciones de diferenciación eritroide. La acción negativa de TNF-alfa sobre células K562 podría explicarse por la disminución de c-FLIP inducida durante la diferenciación eritroide, ya que no se observó apoptosis en células UT-7 con niveles inalterados de c-FLIP. Los mecanismos de protección celular frente a la acción de TNF-alfa estarían mediados por caminos de señalización vía PI3K serían independientes de Bcl-X