CALPAÍNA COMO FACTOR INTERMEDIARIO ENTRE LA ERITROPOYETINA Y LA PROTEÍNA TIROSINA FOSFATASA 1B

CALLERO MARIANA; VOTA DAIANA; CHAMORRO M EUGENIA; VITTORI DANIELA; NESSE ALCIRA

Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina

Congreso; LIV Reunión Anual Científica de la Sociedad Argentina de Investigaciones Clínicas, LVII Reunión Anual Científica de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2009

La Proteína Tirosina Fosfatasa 1B (PTP1B) es una proteína involucrada en laatenuación de la vía de señalización de la eritropoyetina (Epo). Previamente, hemosdemostrado que PTP1B es regulada positivamente por Epo en la línea celular eritroideUT-7, cuyo crecimiento depende totalmente de este factor de crecimiento. En estetrabajo se estudió la modulación de esta fosfatasa en células UT-7 inducidas ahemoglobinización y en células TF-1, que responden a IL-3, GM-CSF y Epo. Enambas, se encontró, una regulación de PTP1B similar a la observada en las célulasUT-7 indiferenciadas a nivel de ARNm (PCR en tiempo real) pero a nivel proteico(Western blotting y citometría de flujo) no se observó disminución en el nivel de PTP1Ben las células deprivadas de Epo o aumento de ella en las células estimuladas coneste factor de crecimiento, sugiriendo que esta fosfatasa sería más resistente adegradación que en las células UT-7 indiferenciadas. Sin embargo, tanto en las célulasUT-7 hemoglobinizadas como en las TF-1 cultivadas en presencia de Epo de formacontinua se detectó una forma adicional de la fosfatasa de peso molecular (46 kDa),distinta de la isoforma de membrana (50 kDa) y de la isoforma citosólica (42 kDa).Mediante fraccionamiento subcelular se determinó que la isoforma de 46 kDapermanece unida a la membrana del retículo endoplasmático, sugiriendo que provienedel clivaje de la isoforma de mayor peso molecular. Teniendo en cuenta que, en otrostipos celulares, se ha descripto a la PTP1B como sustrato fisiológico de la calpaína, seinvestigó su papel en esta regulación de PTP1B por Epo, mediante un protocolo deinhibición (calpeptina) y activación (ionóforo A23187) de esta proteasa calciodependiente. De esta forma se concluyó que calpaína es el intermediario entre la Epoy la PTP1B en las células UT-7 diferenciadas y TF-1.