INVESTIGADORES
VOTA daiana Marina
congresos y reuniones científicas
Título:
EFECTO DIFERENCIAL DE CITOQUINAS PROINFLAMATORIAS SOBRE CÉLULAS EN ETAPA DE DIFERENCIACIÓN ERITROIDE
Autor/es:
VOTA DAIANA; CHAMORRO M EUGENIA; CALLERO MARIANA; NESSE ALCIRA; VITTORI DANIELA
Lugar:
Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina
Reunión:
Congreso; LIII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigaciones Clínicas; 2007
Resumen:
La anemia de enfermedades crónicas se encuentra asociada a procesos inflamatorios caracterizados por la producción aumentada de citoquinas proinflamatorias. En trabajos previos hemos demostrado que la citoquina proinflamatoria TNF-alfa induce apoptosis de células K562 cuando se encuentran en etapa de diferenciación eritroide. El objetivo del presente trabajo es investigar si la IL-1beta produce el mismo efecto y avanzar en el estudio de los mecanismos de acción de ambas citoquinas sobre células diferenciadas.
La hemina (H) 30 µM resultó ser un buen inductor de diferenciación eritroide, determinada por recuento diferencial con tinción por DAF (57,0±5,6%, 48 h), proceso que no fue afectado por TNF-alfa o IL-1beta.
La IL-1beta produjo, al igual que el TNF-alfa un efecto diferencial sobre la línea celular K562. Mientras que la IL-1beta (30-100 µg/ml) incrementó la apoptosis (Hoechst) de células diferenciadas, no afectó a las indiferenciadas (H-IL 20,3±1,76%, IL 9,3±1,76%; P<0.05, n=3). Se corroboró que los efectos observados fueron causados por la acción de la citoquina y no por la hemina (H-IL 20,3±1.76%, H 11±1,73%; P<0.05, n=3). Los resultados de la actividad de caspasa 3 (clivaje de Ac-DEVD-pNA) en tratamientos con TNF-alfa o con IL-1beta concuerdan con los obtenidos por la técnica de Hoechst, confirmando la inducción de apoptosis vía caspasas. La diferenciación eritroide fue acompañada de una significativa disminución de los niveles de ARNm de c-FLIP, proteína supresora de señales apoptótica, determinados por Real Time PCR (H 1,23±0,04 vs. C 0,77<0,04 u. a., P<0.001, n=4). Se puede concluir que el proceso de diferenciación eritroide aumenta la sensibilidad de las células K562 a la acción proapoptótica de distintas citoquinas producidas durante el proceso inflamatorio. La disminución de la expresión de c-FLIP explicaría el efecto atribuido a TNF-alfa y a IL-1beta en presencia de H, sugiriendo la participación de c-FLIP en los mecanismos de la acción de las citoquinas proinflamatorias.