BECAS
SIN cynthya Solange
congresos y reuniones científicas
Título:
Distribución de serotipos de Aggregatibacter actinomycetemcomitans en periodontitis crónica.
Autor/es:
SILVIA ORTEGA; CYNTHYA SIN; DE BIASIO MARIA BARBARA
Lugar:
CORDOBA, TANTI
Reunión:
Congreso; XLVIII REUNION ANUAL DE LA SOCIEDAD ARGENTINA DE INVESTIGACIÓN ODONTOLOGICA; 2015
Institución organizadora:
SOCIEDAD ARGENTINA DE INVESTIGACIÓN ODONTOLOGICA
Resumen:
Objetivo: El objeto de estudio de este trabajo fue establecer la distribución de serotipos de a de Aggregatibacter actinomycetemcomitans en pacientes con periodontitis crónica en distintos estadios utilizando la técnica de Reacción en Cadena de la Polimerasa. Material y métodos: participaron 54 sujetos diagnosticados con periodontitis crónica, entre 35 y 65 años. La periodontitis se clasifico en leve, moderada y severa. Para la detección de Aggregatibacter actinomycetemcomitans se procesaron muestras de placa subgingival obtenidas con cono de papel absorbente y conservado a -20°C hasta su procesamiento. El ADN (Ácido Desoxirribonucleico) se extrajo por el método de CTAB (Bromuro de cetil trimetilamonio) y se utilizó la técnica de reacción en cadena de polimerasa para identificación y serotipado. Se utilizaron controles positivos y negativos consistentes en ADN de cepas de referencia y agua respectivamente; para el serotipado a-e se realizó una PCR Multiplex utilizando cebadores específicos. La reacción se realizó en un volumen final de 20 µl. Las concentraciones finales fueron de 1X Buffer de PCR,1.5mM MgCl2, 0,25mM de cada dNTP (Biodynamics), 2µM de cada primer y 2,0U Taq DNA polimerasa (Promega) más 2µl de los ADN obtenidos . El programa de ciclado consistió en una desnaturalización de 5min. 94ºC, seguidos de 25 ciclos de 40seg. 94ºC, 30seg. 54ºC y 40seg. 74ºC, continuando en con extensión final de 10min. a 74ºC e incubación a 4ºC. Los productos de PCR se separaron por electroforesis en agarosa 1% en buffer TBE1x, teñidos con bromuro de etidio y visualizados por transiluminación UV; los resultados de las reacciones fueron leídos por electroforesis en geles de agarosa teñidos con bromuro de etidio y la visualización realizada por transiluminación UV. Resultados: el serotipo a en periodontitis leve y moderada; serotipo b en moderada y severa, serotipo c en periodontitis leve, y serotipo e en moderada. Aplicando la prueba de Chi 2, no se obtuvieron diferencias significativas entre los grupos y el serotipo presente (p = 0.2139). Conclusión: la presencia de un serotipo u otro no tiene relación con el grado de severidad periodontitis crónica.