Efecto de daunorubicina y doxorubicina en el transporte de poliaminas y la proliferación de epimastigotes de Trypanosoma cruzi

RUIZ MD; FRACCAROLI L; BALCAZAR DE; DE PINO V; LAROCCA L; CARRILLO C

Resistencia, Chaco

Congreso; XXX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2018

Sociedad Argentina de Protozoología

La enfermedad de Chagas es una parasitosis endémica en América Latina causada por elprotozoo Trypanosoma cruzi. Las terapias tripanocidas actuales presentan alta toxicidad por loque existe la necesidad de identificar nuevos blancos más específicos para desarrollar nuevasterapias.Las antraciclinas son drogas antitumorales incorporadas en humanos a través deltransportador de cationes orgánicos hOCT1, que presenta transporte de poliaminas con bajaafinidad. Dado el rol esencial de las poliaminas en T. cruzi, el objetivo de este trabajo esevaluar el efecto de las antraciclinas en la proliferación de epimastigotes y estudiar lainteracción y/o incorporación de dichos compuestos a través de la permeasa de poliaminasTcPAT12.Las cepas de T. cruzi utilizadas en este estudio fueron poblaciones clonales de Y-GFP (control) yde Y-TcPAT12-GFP (sobreexpresante del transportador TcPAT12). Las antraciclinas evaluadasfueron Daunorubicina (Dnr) y Doxorubicina (Dxr).Se evaluó el efecto de Dnr y Dxr sobre la proliferación y viabilidad de epimastigotes de T. cruzimediante curvas de crecimiento y ensayos de MTT bajo diferentes condiciones de cultivo. Dnry Dxr afectaron significativamente la proliferación de epimastigotes tanto de la cepa controlcomo de Y-TcPAT12-GFP. El efecto fue dosis dependiente, mostrando valores de IC50, enambas cepas, en el rango de ~0,3 uM para Dnr y ~3,0 uM para Dxr. La depleción de putrescinaen el medio (14 días) aumentó la sensibilidad de ambas cepas a las antraciclinas (rangos deIC50 de 0,1uM para Dnr y 2,0 uM para Dxr).Por otro lado, evaluamos el transporte de putrescina (permeasa TcPAT12), en presencia dediferentes concentraciones de Dnr y Dxr. Para evaluar la especificidad del efecto, se estudió eltransporte de arginina (TcAAAP411), lisina (TcAAP7) y riboflavina (TcRibj).Las antraciclinas afectaron el transporte de putrescina en ambas cepas. Dnr (50uM) inhibió eltransporte en un 55% en la cepa Y-GFP y 20% en Y-TcPAT12-GFP, mientras Dxr (50uM)presentó una inhibición menor. La incorporación de lisina, arginina y riboflavina no se vioafectada por las antraciclinas, confirmando la especificidad del efecto. Ensayoscomplementarios de competencia sugirieron que Dnr es un inhibidor acompetitivo deltransporte de putrescina.Concluimos que Dnr y Dxr afectan la viabilidad de los epimastigotes de T. cruzi y presentan unainteracción inhibitoria con el transportador de poliaminas TcPAT12, que estaría relacionadacon su capacidad tripanocida.