Trypanosoma cruzi. Evidencias bioinformáticas y bioquímicas del transporte de riboflavina

BALCAZAR DE; BONOMI HR; PEREIRA CA; GOLDBAUM FA; CARRILLO C

Guayaquil

Congreso; XXI Congreso Latinoamericano de Parasitología - FLAP; 2013

Federación Latinoamericana de Parasitología (FLAP)

Introducción La riboflavina es una vitamina (B2) esencial, precursora de las flavinas FMN y FAD, quienes actúan como cofactores de diversas flavoproteínas involucradas en numerosos procesos biológicos. Plantas, hongos y procariotas sintetizan riboflavina de novo mientras que los metazoos, sólo la adquieren por la dieta. Recientemente se identificaron los primeros transportadores específicos en células eucariotas y microorganismos. En este trabajo iniciamos el estudio del metabolismo de la riboflavina en Trypanosoma cruzi, evaluando su capacidad de síntesis y transporte. Materiales y métodos Realizamos una búsqueda in silicoen el genoma de T. cruzipara identificar secuencias homólogas a genes ya descriptos asociados a biosíntesis o transporte de riboflavina. Además, evaluamos el rol de la riboflavina en la proliferación de T. cruzi, cepa Y. Para ello realizamos curvas de crecimiento con epimastigotes utilizando concentraciones crecientes de riboflavina o diversos análogos. Finalmente, medimos incorporación de 3H-riboflavina en epimastigotes. Resultados En el genoma de T. cruzi no se encontraron genes que codifiquen para enzimas de la biosíntesis de riboflavina. Sin embargo, se identificó un putativo transportador homólogo a MCH5 de Saccharomycescerevisiae. La proliferación de epimastigotes disminuyó de forma dosis dependiente tanto con concentraciones subóptimas de riboflavina como con diversos análogos. Ensayos de transporte mostraron que el parásito efectivamente incorpora riboflavina y cuya cinética presenta una fase lineal inicial hasta los 15 minutos. Los valores de velocidad de transporte obtenidos fueron similares a los reportados para otros transportadores de riboflavina. Conclusiones Nuestros resultados sugieren que la riboflavina es esencial para la proliferación de T. cruzi. El parásito carecería de la ruta de biosíntesis y dependería exclusivamente de su incorporación. El transportador putativo identificado es sustancialmente diferente a los de mamíferos y su inhibición o utilización para transportar análogos tóxicos constituiría un blanco para el desarrollo de nuevas moléculas tripanocidas.