Trypanosoma cruzi: cepas transgénicas evidencian el rol de las poliaminas en supervivencia, diferenciación e infectividad del parásito

BARCLAY JJ; BALCAZAR DE; VANRELL MC; RAMOS NAJ; ROMANO PS; CARRILLO C

Rosario

Congreso; XXVI Reunión Anual de la Soc Argentina de Protozoología (SAP); 2013

Sociedad Argentina de Protozoología

La Enfermedad de Chagas es una endemia americana causada por el parásito Trypanosoma cruzi, cuya terapia actual involucra tratamientos poco efectivos e inespecíficos que provocan diversos efectos secundarios. Por ello resulta necesario describir nuevos blancos terapéuticos y encontrar drogas anti-chagásicas. El metabolismo de poliaminas se destaca como un potencial blanco ya que T. cruzi y las células de mamíferos presentan diferencias sustanciales en esta vía metabólica. A diferencia de su hospedador mamífero, T. cruzi no sintetiza poliaminas de novo y depende estrictamente de su transporte desde el medio extracelular a través de la permeasa TcPAT12, que incorpora mayormente putrescina. La auxotrofía del parásito se debe a que carece de la enzima ornitina decarboxilasa (ODC), proteína involucrada en la etapa inicial en la síntesis que convierte L-ornitina en putrescina. En trabajos anteriores construimos una cepa transgénica de T. cruzi que expresa el gen de ODC de Crithidia fasciculata (Y-GFP-ODC) y recientemente obtuvimos una cepa que sobre-expresa la permeasa de poliaminas TcPAT12 (Y-GFP-PAT12). Ambas presentaron importantes modificaciones respecto de la cepa salvaje: en ambas mutantes los niveles intracelulares de putrescina aumentaron 3 veces; y al mes de cultivo presentaron un aumento en la proliferación en medio semi-definido con 0,5 mM de putrescina (tiempo de duplicación de cepa salvaje= 33,6 horas; y de Y-GFP-PAT12= 26,4 horas) y una supervivencia aumentada en medio sin poliaminas (tiempo de duplicación de cepa salvaje= 100,8 horas; Y-GFP-PAT12= 76,8 horas, mientras que Y-GFP-ODC= 45,6 horas y sobrevive en el tiempo por ser protótrofa para poliaminas). También aumentó la diferenciación y se vio modificada la infectividad en células de mamíferos. Estos resultados sugieren que las poliaminas regulan directa o indirectamente varios procesos biológicos del parásito y reafirman al metabolismo de poliaminas como potencial blanco contra T. cruzi.