Expresión del antígeno SAG1 de T. gondii fusionado a la proteína Hsp83 de L. infantum en plantas transplastómicas de tabaco y análisis de su capacidad inmunoprotectiva en el modelo murino

LAGUÍA BECHER, M.; YACONO, M. L.; FARRAN, I.; VERAMENDI, J.; CLEMENTE, M.

Simposio; VIII Simposio Nacional de Biotecnología REDBIO; 2011

REDBIO Argentina

La proteína SAG1 de Toxoplasma gondii es uno de los principales antígenos estudiados para el desarrollo de una vacuna contra la toxoplasmosis. En trabajos previos del laboratorio, se mostró que la inmunización de ratones con extractos de hojas de tabaco que expresan el antígeno SAG1 de T. gondii, confiere protección parcial frente a la infección con T. gondii. Con el objetivo de mejorar la protección obtenida, nos propusimos evaluar las propiedades de la proteína de choque térmico 83 de Leishmania infantum (LiHsp83) como carrier de proteínas y modulador de la respuesta inmune. Para ello, se obtuvieron plantas transplastómicas de tabaco que expresan la proteína SAG1 y la proteína de fusión LiHsp83:SAG1. El análisis de la expresión de dichas proteínas en las plantas transplastómicas mostró que los niveles de acumulación del antígeno SAG1 se incrementaron aproximadamente 5 veces cuando el mismo se fusionó a la proteína LiHsp83. Posteriormente, se inmunizaron ratones C57BL/6 por vía oral con los extractos vegetales expresando la proteína SAG1 (grupo SAG1) y la proteína de fusión LiHsp83:SAG1 (grupo LiHsp83:SAG1). Como control se inmunizaron ratones con extractos de hojas de tabaco wild-type. Dos semanas después de finalizada la inmunización, los ratones se desafiaron por vía oral con una dosis no letal de quistes de la cepa ME49 de T. gondii y al mes del desafío se contó el número de quistes en los cerebros. Los ratones pertenecientes a los grupos SAG1 y LiHsp83:SAG1 mostraron una reducción significativa de la carga parasitaria cerebral en comparación a los ratones del grupo control (grupo SAG1: 48,5% y grupo LiHsp83:SAG1: 71,1%). Estos resultados sugieren que la fusión del antígeno SAG1 a la proteína LiHsp83 no sólo aumentó la estabilidad de dicho antígeno sino que además permitió mejorar la capacidad protectiva del mismo.