Aislamiento y caracterización de bacterias solubilizadoras de fosfato que colonizan la rizosfera de Lotus tenuis en ambientes salino-alcalinos de la Pampa Deprimida del Salado

CUMPA VELÁSQUEZ LM; MAZA E; CASTAGNO LN; SANNAZZARO AI; ESTRELLA MJ

Congreso; XXIII Congreso Latinoamericano de Microbiología; 2016

La región de la Pampa Deprimidade la Cuenca del Río Salado es la zona de cría vacuna más importante de laArgentina, con pastizalesnaturales que constituyen su principal recurso forrajero. Sus suelos son pobres ennutrientes y están sujetos a ciclos de sequía y anegamiento, por ello unaalternativa para incrementar su productividad y calidad forrajera es incorporarleguminosas que toleren dichas condiciones como Lotus tenuis. Esta especie además de ser un recurso de alto valornutricional, establece interacciones con microorganismos benéficos que puedenser aplicados como biofertilizantes. El estudio y la aplicación microorganismosbenéficos que además sobrevivan en suelos restrictivos para el crecimientovegetal, es un factor clave en la búsqueda de herramientas para mejorar laproducción forrajera. Por ello, el objetivo del presente estudio es aislar ycaracterizar bacterias de la rizosfera de L.tenuis que solubilicen fosfato en condiciones salino-alcalinas.Se colectaronplantas de L. tenuis en 3 regiones dela Pampa Deprimida del Salado cuyas características cumplen con las condicionesde salinidad y alcalinidad requeridas para el presente estudio. De la rizosferade dichas plantas se obtuvieron bacterias solubilizadoras de fosfato usando elmedio selectivo NBRIP. A dichos aislamientos se les evaluó la capacidad solubilizadorade fosfato en condiciones salino-alcalinas usando el medio NBRIP suplementadocon 200mM Na2CO3, ajustado a diferentes condiciones de pH(8, 9 y 10). Se utilizó la técnica  BOX-PCR paraobtener perfiles de huellas genómicas con el fin de analizar la diversidad genéticade los aislamientos y seleccionar las cepas no redundantes. La identificacióntaxonómica se realizó mediante la amplificación, secuenciación y análisisfilogenético del gen que codifica el ARNr 16S.Seobtuvo un total de 231 aislamientos, de los cuales 77% mostraron actividadsolubilizadora a pH 9, y 20% a pH 10. Esto sugiere que la mayoría de losaislamientos resultaron eficientes para solubilizar fosfato bajo lascondiciones de estrés evaluadas y que la estrategia de búsqueda de cepas adaptadasnaturalmente a condiciones salino-alcalinas resultó efectiva. El análisis desimilitud de los perfiles BOX sugiere que existe una gran diversidad genéticaentre los aislamientos que solubilizan fosfato en condiciones salino-alcalinas.Por otra parte el análisis filogenético reveló que los aislamientos quesolubilizan fosfato en las condiciones de evaluación más extremas pertenecen a losgéneros Serratia, Rahnella, Enterobacter,Klebsiella y Pantoea. La grandiversidad de bacterias coleccionadas que solubilizan fosfato en condiciones desalino-alcalinas (pH 9 y 10) constituyen el punto de partida para evaluar yseleccionar bacterias que promuevan el crecimiento de L tenuis bajo condiciones de estrés salino-alcalino y además paraestudiar los mecanismos de adaptación y tolerancia a dicho estrés.