INVESTIGADORES
GIACOMODONATO Monica Nancy
congresos y reuniones científicas
Título:
Salmonella spp. en biopelícula resulta menos virulenta que en estado planctónico
Autor/es:
SARNACKI SH; AYA CASTAÑEDA MDR; GARÓFALO A; GIACOMODONATO MN ; CERQUETTI MC; NOTO LLANA M,
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Congreso; XV Congreso Argentino de Microbiología (CAM) - 2019; 2019
Resumen:
Introducción: La formación de biopelículas sobre los alimentos representa un problema para la salud pública ya que se asocia a más del 80% de las infecciones bacterianas. En los últimos años se ha acumulado evidencia de que patógenos humanos, como {Salmonella} Enteritidis ({S}E) crecen predominantemente formando biopelículas, más que en forma planctónica. Objetivo: Determinar,la respuesta generada en el hospedadorsegún el estado de vida de la bacteria infectante.Metodología: La cepa salvaje {S}E 5694 fue cultivada en dos condiciones de vida; biopelícula o planctónica. Para la condición de biopelícula, se cultivó en caldo LB sin cloruro de sodio, a 28°C por 48hssin agitación y para la planctónica, en caldo LB a 37ºC con agitación hasta alcanzar una densidad óptica de 0,6 a 600nm. Modelo murino:ratones BALB/c se inocularonvía intragástrica con 1-3x10^3, 1-3x10^4 y 1-3x10^5 UFC de la bacteria en cada condición de vida. Cinco días post inoculación (pi) se analizó la sobrevida, la colonizaciónbacteriana, el peso esplénico, y la histología intestinal. En otros ensayos, los animales fueron inoculados intraperitonealmente con 0.5 mg/kg de LPSde {S}E extraído a partirdecultivoen condiciones debiopelícula o planctónico. Los niveles de citoquinas en sangre se determinaron por ELISA antes de la administración del LPS, 6 y 24 hspi.Modelo celular: cultivos de células endoteliales Ea.hy926 se inocularon con una multiplicidad de infección de 10, con los dos modos de vida de la bacteria.Se evaluó la capacidad de invasión y la expresión de IL a los 90 min pi. Resultados: En el modelo murino, ningún animal murió cuando fue inoculado con 1-3x10^3 UFC de {S}E en biopelícula, mientras que la misma cantidad de UFC de inóculo planctónico produjo una mortalidad del 25% de los ratones. Este porcentaje recién se alcanzó con una dosis infectiva de {S}E en biopelícula de 2 órdenes más alta, junto con una superior colonización del bazo. Independientemente de la dosis infectante, encontramos mayor conservación estructural del intestino de los animales inoculados con biopelículas de {S}E en comparación con aquellos inoculados con la misma dosis del estado planctónico. También determinamos que el LPS planctónico induce mayores niveles de IL-6 y TNF-a circulante que el extraído de biopelículas. De igual manera, en células en cultivo, la biopelícula de {S}E mostró tener menor capacidad invasiva induciendo cantidades disminuidas de IL6 y 8 respecto a las inducidas por aquellas en estado de vida libre.Conclusión: El modo de vida en biopelícula de {Salmonella} es menos virulento e invasivo e induce menor respuesta inflamatoria que su contraparte planctónica. Esto podría deberse ?en parte- a la disminuida actividad inflamatoria observada producida por el LPS extraído del estadode biopelícula de {Salmonella} comparado con el planctónico.Sin dudas, se necesitan más estudios para la comprensión de la función de la biopelícula de {Salmonella} en la virulencia.