INVESTIGADORES
BONGIOVANNI ABEL silvestre manuel
congresos y reuniones científicas
Título:
DESARROLLO DE NANOPARTÍCULAS BIOCOMPATIBLES PARA TRANSFECCIÓN DE CÉLULAS EN CULTIVO
Autor/es:
A. LIAUDAUT; F. ALUSTIZA; V. CAPELLA; S. BONGIOVANNI ABEL; P. CAPPELLARI; A. ALESSIO; A. FILI; C. A. BARBERO; N. RODRIGUEZ; P. BOSCH
Lugar:
Còrdoba
Reunión:
Encuentro; XLVII REUNION ANUAL DE LA SOCIEDAD ARGENTINA DE FARMACOLOGÍA EXPERIMENTAL; 2015
Resumen:
La nanotecnología promete tener repercusiones de gran alcance para la sociedad. En la actualidad se emplea en el desarrollo de nuevas estrategias biológicas como las alimentarias, farmacéuticas y de transgénesis. En este sentido, el transporte de ácido nucleicos a través de la membrana celular se considera uno de los pasos limitantes a la hora de implementar metodologías que se basan en la transferencia de genes. El objetivo del presente trabajo es generar una plataforma tecnológica basada en nanopartículas (NP) como agentes con capacidad para vehiculizar ácidos nucleicos (ADN y ARN) al interior de células en cultivo. Para cumplirlo se estudiaron NP de polianilina (PANI), de oro (NP-Au) y de hidrogeles. Se trabajó con la línea celular 3T3 proveniente de fibroblastos embrionarios de ratón, sobre la cual se probó diferentes concentraciones de NP y se evaluó la viabilidad celular a través de dos técnicas: cristal violeta y por la reducción metabólica del bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-ilo)-2,5-difeniltetrazol (MTT). La morfología de las células tratadas se analizó por microscopía de contraste de fases y por tinción fluorescente con naranja de acridina. Para evaluar la capacidad de unión de las NP al ADN se utilizó el plásmido que codifica una proteína fluorescente p-MAX y la técnica de corrida electroforética en gel de agarosa. La capacidad de transfección del ADN se analizó por microscopía de fluorescencia. Los resultados obtenidos indican que la mayor concentración de NP de PANI estudiada disminuyó la viabilidad celular en un 17% mientras que las NP-Au y de hidrogeles no provocaron alteraciones en el parámetro celular evaluado. De manera similar, la morfología celular se modificó cuando las células se expusieron a las NP de PANI y permaneció sin alteración con igual concentración de NP-Au e hidrogeles. En cuanto a la capacidad de unión al ADN, todas las NP evaluadas se unieron al material genético con distinto grado de afinidad. Por último, cuando se evaluó la capacidad de transfección, sólo las NP de PANI mostraron capacidad para vehiculizar ADN al interior de las células en cultivo. En conclusión, las nanopartículas estudiadas no son citotóxicas o poseen baja toxicidad y las NP de PANI fueron capaces de facilitar el ingreso de ADN al interior de las células en cultivo. Más estudios son necesarios para optimizar las condiciones que maximicen el ingreso de ácidos nucleicos al interior celular.