Establecimiento y caracterización de una línea celular inmortalizada de células de papila dérmica humana respondedora a andrógenos

MARIA LIA CASTELLANOS; ANA GABRIELA KUSINSKY; GUSTAVO JOSÉ LEIRÓS; MARIA EUGENIA BALAÑÁ

Congreso; Reunion Anual de la Sociedad Argentina de investigación Clinica; 2013

La papila dérmica es un grupo discreto de células de origen mesenquimal localizada en la base del folículo piloso e implicada en el control y la regulación del ciclo de crecimiento del pelo. Dichas células (CPD) envían señales a células madre epidérmicas multipotentes (HFSC) promoviendo su diferenciación a linajes propios de folículo piloso. En la alopecia androgenética (AGA) los andrógenos circulantes causan la miniaturalización de los folículos pilosos sensibles del cuero cabelludo debido a la alteración en la producción de estos factores parácrinos. En nuestro laboratorio hemos establecido y caracterizado una línea inmortalizada de CPD humana, a la que hemos transfectado con el receptor a andrógenos (AR). Mediante la técnica de dilución límite hemos seleccionado un clon cuya expresión de AR se mantiene estable por más de 50 pasajes. Se ha descripto que dickkopf-1 (DKK-1) se sobre-expresa en CPD alopécicas en presencia de DHT, en nuestro estudio observamos un aumento de 30 veces en los niveles de mRNA de DKK-1 de la línea en respuesta a DHT. Las CPD primarias presentan una serie de marcadores característicos. La actina de musculo liso, expresada por nuestra línea, es característica de CPD en cultivo. La actividad fosfatasa alcalina que sólo está presente en pasajes bajos de cultivos primarios de DPC y es un indicador de capacidad inductora a pelo, se encuentra presente a lo largo de los sucesivos pasajes en la línea. Para comprobar esta capacidad inductora, se realizaron ensayos de co-cultivo con HFSC las cuales diferenciaron a linajes de pelo en condiciones control, evidenciada por la expresión de la keratina especifica de pelo 6 (K6hf). Mientras que la presencia de andrógenos en el medio abolió dicha diferenciación. Así hemos obtenido una línea que imita el comportamiento de las CPD respondedoras a andrógenos en pasajes tempranos, lo que nos permitirá una mejor comprensión de los mecanismos de interacción epitelio-mesenquima en folículos pilosos sanos y alopécicos.