GolS induce un sistema de eflujo tipo CBA especìfico de Salmonella que confiere resistencia a oro y compuestos orgánicos

PONTEL, L. B.; PÉREZ AUDERO, M. E.; ESPARIZ, M.; CHECA, SUSANA K.; SONCINI, F. C.

Buenos Aires

Congreso; IV Congreso Argentino de Microbiología General.; 2007

Sociedad Argentina de Microbiología General

Las bacterias pueden adaptarse y crecer en presencia de diferentes compuestos tóxicos, como por ejemplo metales pesados o drogas orgánicas. En nuestro laboratorio se identificó y caracterizó un regulador transcripcional de la familia MerR específico de Salmonella al que se denominó GolS. Este regulador monitorea los niveles de Au en el entorno y desencadena la respuesta celular a este metal, controlando la expresión de la ATPasa tipo-P GolT y de la proteína de unión a metales GolB. Durante la caracterización del regulón gol observamos que las mutantes en el regulador golS presentaron un marcado defecto en la resistencia a Au. Llamativamente, la detección simultanea de los dos efectores golT y golB presentó un fenotipo intermedio, indicando la existencia de otros genes controlados por GolS e involucrados en la resistencia al metal. En este trabajo realizamos un análisis in silico del genoma de Salmonella para encontrar nuevos genes bajo el control de GolS que estén involucrados en la resistencia a oro. Identificamos el locus gesABC específico de Salmonella. Este locus codifica para un sistema de eflujo tipo CBA y se encuentra adyacente a golTS. La expresión de GesABC está controlada por GolS. El sistema de eflujo participa en la resistencia a AuHCl4 pero no a otros metales. Mediante ensayos de ?footprinting? determinamos el sitio reconocido por GolS en el promotor de gesA y, al realizar ensayos comparativos in vivo e in vitro, observamos que la expresión de este locus está retardada comparada con la de los otros miembros del regulón gol. Este retraso se debe a una menor afinidad del regulador por su operador en el promotor de gesA respecto a los operadores presentes en golTS y golB. De esta manera, GesABC se expresa sólo cuando los niveles intracelulares de GolS superan un umbral determinado. Existe, por lo tanto, una expresión jerárquica de genes dentro del regulón gol que permite la supervivencia de la bacteria en ambientes con diferentes niveles tóxicos de Au. Las bombas de eflujo tipo CBA son de un amplio espectro en cuanto a los sustratos que transportan. En Salmonella, observamos que cuando se crece a las bacterias en presencia de concentraciones de GesABC son suficientes para inducir co-resistencia a azul de metileno y cristal violeta. Esto indica que GesABC funciona como una bomba de eflujo versátil confiriendo resistencia a compuestos tan disímiles como Au y drogas orgánicas.