PERFIL PROTEÓMICO DEL HONGO DE PUDRICIÓN BLANCA PLEUROTUS SAJORCAJULBM 105 EN CONDICIONES DE REMOCIÓN DE BIFENILOS POLICLORADOS Y SU IMPLICANCIA COMO AGENTE BIORREMEDIADOR

CHELALICHE A.S.; ALVARENGA A.E.; ZAPATA, P. D.; FONSECA M.I.

Congreso; XV Congreso Argentino de Microbiología - CAM 2019. V Congreso Argentino de Microbiología de Alimentos - V CAMA. V Congreso Latinoamericano de Microbiología de Medicamentos y Cosméticos -CLAMME 2019; 2019

Introducción y Objetivos:Los bifenilospoliclorados (PCBs) son compuestos químicos compuestos de una molécula de bifenilo con 1 a 10 sustituciones de cloro. Estos compuestos fueron ampliamente utilizados en el ámbito industrial desde 1930. Como consecuencia de su uso, grandes cantidades de PCBs han sido distribuidos en el ambiente lo que representa una amenaza para el ecosistema. Los hongos de pudrición blanca, han sido ampliamente utilizados en procesos de remediación para degradar varios congéneres de PCBs. El basidiomycete Pleurotus sajor-cajuha demostrado una excelente resistencia a los Aroclores 1242, 1254 y 1260; y una alta tasa de remoción de los mismos en medio líquido, llegando a obtenerse porcentajes de remoción de hasta 98%. Aunque la capacidad de los hongos de pudrición blanca para remover xenobióticos ha sido ampliamente documentada existe poco conocimiento acerca de las enzimas ocupadas por el hongo para poder degradarlos. En este estudio, se analizaron comparativamente los proteomas de la cepa de P. sajorcajuLBM105 en medios de cultivo líquidos deficiente de nitrógeno tanto en presencia como en ausencia de los aroclores 1242, 1254 y 1260, buscando encontrar las posibles enzimas involucradas para remover estos compuestos contaminantes. Materiales y Métodos:Para la obtención de las proteínas abundantes durante la degradación de los PCBs se procedió a incubar 20 ml de medio de cultivo sintético líquido deficiente en nitrógeno de glucosa-asparagina suplementado con una solución de 200 ppm de PCBs conteniendo una mezcla de los Aroclores 1242, 1254 y 1260. Paralelamente se evaluó la situación control sin el agregado de la solución de PCBs. El micelio fúngico obtenido de P. sajor-cajuobtenido que fue expuesto a los bifenilospoliclorados fue lavado mediante 3 lavados con acetona. La ruptura celular se realizó mediante la utilización de nitrógeno líquido en presencia de buffer de extracción. El extracto obtenido fue reducido, alquiladoy precipitado. Las proteínas obtenidas fueron tratadas con Tripsina y analizadas por nanoHPLC acoplado a un espectrómetro de masas Q-Exactive. Resultados:De las proteínas identificadas que se mostraban significativamente sobre-expresadas se destaca la presencia de reductasas de cadena corta, aldo-ceto reductasas, galactosa oxidasas, peroxidasas, lacasas y carboxilesterasas. En cambio, se observó una disminución en la expresión de oxilipinas, piruvato carboxilasas y chaperonas (Hsp70, DnaJ, Hsp90). Conclusiones:Los perfiles de expresión de estas proteínas evidencian la presencia de procesos oxidativos relacionados con modificaciones en la estructura de los PCBs, posiblemente involucrando la dehalogenación de sus anillos mediada por especies reactivas del oxígeno y la reducción de sus metabolitos de degradación y del estrés oxidativo sufrido por los mismos evidenciada por la disminución de expresión de proteínas involucradas en el metabolismo del carbono y de los lípidos, que además parece afectar a la expresión de varias chaperonas.