INVESTIGADORES
NUSBLAT alejandro David
congresos y reuniones científicas
Título:
Enzimas para la biotransformacion de colesterol y otros esteroles: expresión en Saccharomyces cerevisiae
Autor/es:
TOMÁS J. POKLÉPOVICH; MARIELA L. TOMAZIC; JOSEFINA CAILLAVA; ALEJANDRO D. NUSBLAT; CLARA B. NUDEL
Lugar:
Ciudad de Buenos Aires
Reunión:
Congreso; 7º CONGRESO Y EXPOSICIÓN PARA LA PRODUCCIÓN FARMACÉUTICA, BIOTECNOLÓGICA Y VETERINARIA; 2012
Institución organizadora:
ETIF
Resumen:
A diferencia de otros organismos eucariotas, el
ciliado, Tetrahymena thermophila no sintetiza esteroles ni tampoco los
requiere para su crecimiento, en cambio sintetiza el gamaceran-alcohol,
tetrahymanol. Sin embargo, Tetrahymena tiene la capacidad de metabolizar
esteroles cuando son agregados al medio de cultivo, modificarlos e
incorporarlos a su membrana, al mismo tiempo que inhibe la síntesis de
tetrahymanol. Hasta el presente se describieron cuatro actividades: C-5(6), C-7(8) y C-22(23)
esterol desaturasas (DES), las cuales introducen dobles enlaces en las
posiciones C-5, C-7 y C-22, de los esteroles, respectivamente, y C-24 des-etilasa, que cataliza la remoción
del grupo etilo del C-24 de la cadena lateral de C29 esteroles. Al dia de hoy, nuestro
grupo a identificado 3 de los genes correspondientes a estas enzimas.
Las esterol desaturasas son
enzimas de gran interés ya que pueden ser utilizadas para reducir el contenido
de colesterol en los productos alimenticios, tales como suspensiones de leche y
huevo. Incluso puede tranformarse el colesterol en provitamina D en un solo
paso enzimático (Patente de EEUU 6.534.100). Esta biotransformación se debe a
la actividad de la enzima C-7 esterol desaturasa.
En este trabajo se muestra
como Tetrahymena puede ser manejada para la reducción del colesterol en
alimentos fluidos como la leche y el huevo de hasta un 50%. Generando como
productos de la biotransformacion derivados del colesterol como son provitamina
D y compuestos con actividad de fitosteroles.
Debido a la alteracion de las caracteristicas
organolépticas de los alimentos tratados con Tetrahymena, se buscó expresar
estas enzimas en algun organismo GRAS, con el fin de probar este nuevo
microorganismo como plataforma para la biotransformacion y de estudio de las
enzimas. En este caso mostramos la expresion de la enzima C5 sterol desaturasa
en Saccharomyces cerevisiae.
Los resultados obtenidos en este trabajo muestran el
potencial uso de las desaturasas de esteroles de Tetrahymena thermophila
en el campo de la biotransformación.
La correcta expresión de la esterol C-5 esterol
desaturasa en sistemas heterólogos como la
levadura realizada recientemente en nuestro laboratorio, la
identificación génica de la C-7 esterol desaturasa y su estudio posibilitarán,
sin dudas, su uso para la reducción de colesterol como también el uso de estas
enzimas para la biotransformación de otros esteroles.