INVESTIGADORES
NUSBLAT Alejandro David
congresos y reuniones científicas
Título:
Análisis genómico de la vía metabólica de esfingolipidos en Tetrahymena thermophila e identificación del gen codificante de una ácido graso 2-hidroxilasa de esfingolípidos.
Autor/es:
CID NICOLAS; MARIA LUZ SANCHEZ; CLARA B. NUDEL; A. D. NUSBLAT
Lugar:
CABA
Reunión:
Congreso; XXVII Reunión Anual; 2015
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Protozoologia
Resumen:
Los esfingolípidos constituyen una familia de lípidos de importancia no solo por participar en la estructura de las membranas biológicas sino también por su papel como moléculas bioactivas, participando de procesos tales como transducción de señales, tráfico vesicular, apoptosis, entre otros. Los esfingolipidos se encuentran en todas las células eucariotas como también en algunas bacterias anaeróbicas como por ejemplo Fusobacterium, Sphingomonas y Sphingobacterium.En los últimos veinte años, el estudio de esfingolipidos en varios organismos ha contribuido a un avance significativo en este campo. No solo se han utilizado células de mamíferos, sino también invertebrados, hongos y plantas. La utilización de otros organismos posibilitara avanzar en la investigación, de forma más acelerada. En este sentido los ciliados, como Tetrahymena thermophila,  son organismos promisorios para su explotación en esfingolipidos. Tetrahymena es un protozoario ciliado el cual ha sido utilizado desde hace tiempo en investigación como organismo modelo eucariota. Ha sido extenso su uso en el estudio de telomeros y telomerasas, ARN autocataliticos, histonas y otros procesos biológicos de vital importancia.Por eso se ha encarado el estudio del metabolismo de los esfingolípidos en Tetrahymena thermophila, ya que si bien se han reportado la presencia de diversas especies de esfingolípidos en Tetrahymena, no se conoce el rol biológico de estos, ni tampoco se encuentran identificados los genes involucrados en su metabolismo. El conocimiento del rol fisiológico de estos lípidos permitiría poder extrapolar estas funciones a células eucariotas más complejas. Mediante búsquedas bioinformáticas se ha construido una vía metabolica de esfingolípidos putativa en el ciliado, identificándose la presencia de paralogos para la mayoría de los pasos enzimáticos involucrados.De los genes obtenidos se procedió a noquear el único gen candidato para una ácido graso 2-hidroxilasa putativa mediante transformación del Macronúcleo por bombardeo biolistico, evidenciandose la perdida de  actividad hidroxilasa mediante Cromatografía gaseosa.La mutante no demostró en principio otros cambios fenotípicos significativos respecto a la cepa salvaje. La identificación del gen de la enzima ácido graso 2-hidroxilasa se convierte de esta manera en el primer gen del metabolismo de esfingolípidos en ser identificado, no solo en T. thermophila, sino en el grupo de ciliados en general.
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