EVIDENCIAS DE INTERACCIÓN EPITELIO MESÉNQUIMA EN UN MODELO DE CULTIVO IN VITRO DE MUCOSA DE OVIDUCTO

VALDECANTOS PABLO A.; VELLA MILDA ALEJANDRA; JIMENEZ M; GARCIA EV; GARCÍA DANIELA CELESTE; ROLDÁN OLARTE MARIELA

Tafi Viejo

Jornada; XXXVI Jornadas Científicas- Asociación de Biología de Tucumán; 2019

Asociación de Biología de Tucumán

El oviducto de los mamíferos desempeña un papel crítico en los procesos involucrados en la fertilidad femenina. El epitelio del oviducto es importante para el éxito reproductivo y consiste en un epitelio columnar simple formado principalmente por células ciliadas y células secretoras. El objetivo de este trabajo fue obtener un sistema de cultivo in vitro equivalente a la mucosa deloviducto que preservara la estructura y función de células ciliadas y secretoras. Se obtuvieron cultivos primarios de células epiteliales (CEOB) y fibroblastos estromales (FOB) de la región del ámpula de oviductos de vacas. Se prepararon hidrogeles de colágeno tipo I en forma de discos de 10 mm x 2 mm con o sin fibroblastos (2x105 células/mL) en su interior; éstos se incubaron enmedio DMEM/F12 con 5% suero fetal bovino a 38,5 °C, 5% CO2 y 100% de humedad durante 16 h. Posteriormente se sembraron CEOB en la parte superior de los geles y se incubaron sumergidos durante 48 h; se continuó incubando 15 días en interfase aire-líquido en presencia de 17-β-estradiol y progesterona para simular los estadios preovulatorio (E2: 290 pg/mL; P4: 6 ng/mL) y luteal medio (E2: 86 pg/mL; P4: 120 ng/mL). Los cultivos se procesaron para tinción histoquímica. En el estadio luteal simulado predominaron CEOB cuboides con protuberancias citoplasmáticas apicales; en el estadio preovulatorio simulado, las CEOB fueron cilíndricas con predominio de células ciliadas. La presencia de fibroblastos favoreció el desarrollo de células ciliadas. Los resultados indican que el modelo de cultivo 3-D obtenido permitiría estudiar in vitro procesos biológicos relacionados con las funciones del oviducto.