BECAS
GIMÉNEZ MARTÍNEZ Pablo Darian
congresos y reuniones científicas
Título:
Ácido úsnico y su sinergismo con saponinas de lúpulo: nuevo rol en el control de Paenibacillus larvae, agente causal de la enfermedad loque americana en abejas
Autor/es:
GIMÉNEZ MARTÍNEZ PABLO DARIAN; RAMIREZ, CRISTINA; IGLESIAS, AZUCENA; FUENTES GISELL; ACOSTA RAMIRO; FANOVICH ALEJANDRA; MAGGI MATIAS; FUSELLI SANDRA
Reunión:
Congreso; XV Congreso Argentino de Microbiología - CAM 2019.; 2019
Resumen:
Introducción y Objetivos: El ácido úsnico es uno de los metabolitos secundarios presentes en los líquenes que aportan protección frente a diversos microorganismos, siendo comúnmente utilizado en la industria farmacéutica por su conocida bioactividad. En la apicultura el uso indiscriminado de antibióticos de síntesis para controlar la patología Loque Americana, producida por la bacteria Gram positiva Paenibacillus larvae ha generado la aparición de cepas resistentes como la presencia de residuos en los productos comerciales de la colmena. Por consiguiente, los objetivos del presente trabajo fueron: 1) Determinar la acción bactericida del ácido úsnico frente a dos cepas de P. larvae, 2) Evaluar el sinergismo entre el ácido úsnico y extractos de saponinas y 3) Comprobar su toxicidad frente a Apis mellifera.Materiales y Métodos: El ácido úsnico marca Sigma-Aldrich fue empleado para nuestros estudios. Los extractos de saponinas utilizados correspondieron a 3 variedades de hojas de H. lupulus (Cascade, Victoria y Spalt), secados y retomados con cloroformo. La cuantificación de saponinas se llevó a cabo mediante la reacción de Liebermann- Burchard y una variante de la reacción de Salkowski, expresada como mg de saponina por gramo de peso de droga para las hojas secas de las tres variedades. Para evaluar el sinergismo se utilizó la técnica de difusión en agar y para la determinación de la Concentración Inhibitoria Mínima (CIM) se empleó la técnica de microdilución en caldo. Se prepararon dos soluciones stock de ácido úsnico con el disolvente Dimetil sulfoxido de 150 y 100 μg/mL, las concentraciones que se probaron frente a dichas cepas fueron desde los 4.17 hasta los 50 μg/mL. A fin de evaluar la toxicidad de la CIM obtenida frente a A. mellifera se realizaron dos ensayos: 1) se aplicó la concentración obtenida en el alimento de las larvas y 2) en las abejas adultas se aplicó la solución en el ―Candy‖ (mezcla de azúcar impalpable y agua), para ambos ensayos se registró la mortalidad a las 24, 48 y 72 horas.Resultados: La CIM obtenida, mediante la técnica de microdilución en caldo, para las dos cepas de P. larvae fue de 16.67 μg/mL. Cuando se analizó el sinergismo entre los extractos de saponinas y el ácido úsnico, las CIM determinadas fueron considerablemente menores para las tres combinaciones ensayadas, correspondiendo a 0.079, 0.492 y 3.465 μg/mL, para las 3 variedades de H. lupulus (Cascade, Victoria y Spalt), respectivamente.Conclusiones: Los ensayos de toxicidad demostraron que el ácido usnico no es tóxico frente a larvas e individuos adultos de A. mellifera. El ácido úsnico es un promisorio agente antimicrobiano natural para combatir la enfermedad Loque Americana, y conjuntamente, la utilización de saponinas aporta sinergismo en su actividad antimicrobiana. La utilización de estos compuestos evitaría las problemáticas ocasionadas por los productos de síntesis.