BECAS
MOLINA MarÍa Carolina
congresos y reuniones científicas
Título:
Aplicación de nanopartículas de PLGA:PEI:ADN en la transfección de ADN a leucocitos sanguíneos.
Autor/es:
DONALISIO, DAVID OSCAR; MOLINA, MARÍA CAROLINA; JERKE, GLADIS
Lugar:
Posadas, Misiones
Reunión:
Jornada; Jornadas Científico Tecnológicas; 2018
Institución organizadora:
Universidad Nacional de Misiones
Resumen:
La habilidad de transportar y dirigir moléculas a localizaciones específicas del cuerpo y de guiarlas intracelularmente es un campo de activa investigación y de interés creciente, siendo relevante el diseño de vehículos o vectores a partir de materiales adaptables al trinomio eficiencia, seguridad y precisión en el transporte. Entre ellos, las nanopartículas poliméricas entraron en escena como vectores de tipo no viral para el transporte de ácidos nucleicos por su potencial aplicación en el área biomédica. En particular, los sistemas de transporte basados en PLGAPoly(lactic-co-glycolicacid) sostienen la ventaja de las propiedades de biodegradabilidad y biocompatibilidad de este material.En este trabajo, el objetivo fue emplear nanopartículas de PLGA-(fluoresceína sódica) funcionalizadas con PEI (Polyethylenimine) como sistema de transporte de ADN al interior de células obtenidas a partir de sangre periférica. Se prepararon nanopartículas de PLGA encapsulando fluoresceína sódica 2 mg/mL mediante el método de la doble emulsión-evaporación. Se optó por dicho fluorocromo debido a que permite la detección temprana de la transfección ya que, en condiciones de pH fisiológico, no es capaz de atravesar las membranas celulares. La caracterización fue llevada a cabo mediante microscopía electrónica de barrido y por microscopía de fluorescencia. Se testeó el uso de las nanoesferas de PLGA-(fluoresceína sódica) funcionalizadas con PEI como sistema de transporte de ADN en células de sangre periférica.Nuestros resultados arrojaron que la metodología de preparación de nanopartículas de PLGA-(fluoresceína sódica) fue adecuada, ya que se obtuvieron partículas en el rango nanométrico, con un diámetro medio de 566 nanómetros, estimado a partir de mediciones de microfotografías electrónicas de barrido. A su vez, las partículas presentaron morfología esférica, lisa y sin poros visibles. Los resultados de las observaciones mediante microscopía de fluorescencia confirmaron que el fluorocromo se encontraba encapsulado. Finalmente, nuestros resultados muestran la efectiva internalización del sistema PLGA-(fluoresceína sódica):PEI:ADN al interior de leucocitos ya que éstos pudieron detectarse bajo microscopía de fluorescencia.