Comparación de adn de muestras de colección y frescas de Hamadryas epinome (C. Felder & R. Felder, 1867) de la provincia de Misiones, Argentina (Lepidoptera: nymphalidae)

CENTENO YANELA C; ANA C. ALONSO; FERNÁNDEZ DIAZ CECILIA

Mendoza

Congreso; X Congreso Argentino de Entomologia; 2018

En la provincia de Misiones, Hamadryas epinome (C. Felder & R. Felder, 1867) una especie restringida a América del Sur, es conocida por presentar coloración críptica con la corteza de los árboles y por producir un sonido ?chasquido? audible o ?estridulación?. La reducción de las áreas naturales conduce a la disminución de las poblaciones, por lo cual las colecciones biológicaspueden llegar a ser los únicos sitios que guardarán pruebas de la existencia de formas de vida ya desaparecidas. La preservación de estos especímenes y su información asociada funcionan como bancos de datos que sirven como base para diversos estudios. La metodología barcoding utiliza un código de barras molecular que se obtiene de un fragmento del gen mitocondrial citocromo oxidasasubunidad I (COI), gen presente en más del 95 % de las especies descriptas hasta el momento. En este trabajo se buscó comparar ADN genómico total extraído de muestras frescas y de colección de H. epinome de la provincia de Misiones y determinar a nivel de especie utilizando el gen COI. Para ello se utilizaron 23 muestras, 10 consistieron en ejemplares frescos y 13 de colección con 10, 20 y 30 años de antigüedad obtenidas del Programa de Investigación Entomología de Misiones (PrEM) FCEQyN, UNaM. La extracción de ADN se realizó mediante un protocolo modificado, sin fenol en ambos tipos de muestras. Se amplificaron las secuencias del marcador mitocondrial COI con cebadores especie específicos y, finalmente se enviaron para secuenciar a Macrogen Inc. La cuantificación de ADNtuvo una concentración promedio de 86,77 y 50,05 ng/ul, con pureza de 1,76 y 2,29 para muestras frescas y de colección respectivamente. En ambos casos se obtuvieron bandas únicas de tamaño aproximado (500 pb). La identificación taxonómica mostró que todas las muestras pertenecen a H. epinome. La extracción de ADN genómico fue exitosa en ambos casos, pudiendo indicar que las condiciones de preservación bajo las cuales se encuentran las muestras de colección mantienen la integridad del ADN. Además, este estudio sugiere la viabilidad de utilizar material de colección como una alternativa para pruebas moleculares.