DETERMINACIÓN DE TRANSFERRINA EN PLASMA SEMINAL PARA EL ESTUDIO DE LA FUNCIÓN REPRODUCTIVA

BARONE S; BRUNO C; ALFARO S; CORDISCO GONZALEZ S; TORREZ M; GARCIA ROSASCO M; MARCELA ME; BRUFMAN A

Zavalla, Santa Fe

Congreso; XV Congreso y XXXIII Reunión Anual; 2013

Sociedad de Biologia de Rosario

La transferrina es una glicoproteína transportadora de hierro. Se encuentra en la sangre y otros fluídos de mamíferos. Se conocen diferentes tipos de tranferrinas (Tf) entre ellas la Tf sérica (TfS), sintetizada por el hepatocito. La Tf testicular (TfT) es secretada por las células de Sértoli y constituye el 1,5 % de las proteínas totales del plasma seminal. Está involucrada en el transporte de hierro (Fe) desde el suero a las células germinales en desarrollo. El objetivo de este trabajo es poner a punto una técnica para el dosaje de Transferrina en plasma seminal para su posterior uso como marcador biológico en la función reproductiva. Se estudiaron muestras de semen y suero de 30 controles voluntarios sanos. Las muestras analizadas se obtuvieron por extracción de 10 ml de sangre venosa sin anticoagulante y por masturbación. Se realizó estudio de semen según normas OMS 2010. El plasma seminal se separó de los espermatozoides por centrifugación a 1200g durante 30 min. La determinación de transferrina de cada control normal se realizó sobre 100 µL de plasma seminal (PS) y 100 µl de suero. Para cuantificar la Tf en muestras de suero y PS se calculó la fijación total de hierro por método espectrofotométrico indirecto (UIBC/TIBC, WIENER LAB®). Para la determinación de transferrina en plasma seminal se modificó la técnica comercial de UIBC ajustando el pH a 7,4 con Buffer PBS/Ham-F 10 y tratando las muestras con 10mUI de Hialuronidasa (Sydney- IVF®) 15 min a 37ºpara disminuir la viscosidad. Resultados: Se expresan los resultados como media ± desvío standard Transferrina en suero (TfS): 25,77± 7,79 µg/ml, Transferrina en plasma seminal (TfT): 24,11± 6,21 µg/ml. Los valores hallados fueron similares a los encontrados por otros autores con técnicas como Inmunoturbidimetría, Electroforesis 2-D y espectrometría de masas. No se observan diferencias significativas entre las medidas de las medias del dosaje de transferrina, tanto en plasma seminal como en suero. Aunque es necesario analizar mayor número de muestras, la técnica desarrollada es práctica y sencilla, y podría ser aplicada al estudio de transferrina en PS. La Tf es el mayor transportador de hierro en el organismo. El hierro juega un rol importante en el crecimiento celular mediante la catálisis de reacciones claves en el metabolismo energético y la síntesis de ADN. La función de la Tf en los testículos es desconocida pero se cree que participa en el desarrollo de las células germinales. (Barthelemy C., 1988). La Transferrina en plasma seminal, cumpliría un rol potencial en la protección del espermatozoide, capacitación, reacción acrosómica e interacción espermatozoide-ovocito(Souza, 2012). Este trabajo es el punto de partida para utilizar esta técnica en el dosaje de TfT en semen como posible marcador biológico de la función reproductiva