Evaluación del material de partida para la extracción de ADN en Coleópteros mediante kit comercial

MACARENA MORENO RUIZ HOLGADO; EDUARDO MARTÍN; MARCELA BONANO

Mar del Plata

Congreso; XLIV Congreso Argentino de Genética; 2015

Sociedad Argentina de Genética

La extracción y purificación de ácidos nucleicos constituye la primera etapa de la mayoría de los estudios de biología molecular. Los diferentes protocolos de extracción buscan optimizar la cantidad y pureza de ADN obtenido, como así también garantizar la eliminación de inhibidores potenciales que entorpezcan reacciones posteriores de ligación, clonación y secuenciación. Si bien los kits comerciales son eficaces para extracción de ADN genómico de una amplia variedad de materiales (e.g.: sangre, cultivos celulares, tejido animal, levaduras, etc.), estos generalmente no están ajustados para la extracción en invertebrados como ser de tejidos de Coleópteros (e.g.:Astylus atromaculatus y Cycloneda sanguínea). Además, la cantidad de tejido de partida sugerido en los kits es de 25 mg (e.g.: animales) y debemos tener en cuenta que un individuo completo de A. atromaculatus pesa 23 mg aprox. El objetivo de nuestro trabajo fue determinar el mínimo de tejido necesario para obtener una extracción de ADN exitosa en Coleópteros con un kit comercial, para lo cual se testearon diferentes cantidades de tejido de partida de las especies mencionadas. La efectividad de la extracción de ADN se corroboró mediante corrida electroforética. La cantidad mínima de material de partida necesario para una extracción exitosa fue de 3 mg aprox. Si bien los análisis biológicos que requieren la conservación de la integridad morfológica del espécimen no serán posibles con esta extracción, podemos concluir que el kit produce extracciones exitosas de ADN en Coleópteros con baja cantidad de material de partida.