La disrupción de la membrana citoplasmática inducida por Enterocina CRL35 requeriría del anclaje en la membrana celular

BARRAZA, DANIELA E.; CHALON, MC.; ACUÑA, LEONARDO; MINAHK CJ; BELLOMIO AUGUSTO

San Miguel de Tucuman

Jornada; XI Jornadas Científicas y Encuentro de Jóvenes Investigadores, Augusto Palavecino; 2010

La disrupción de la membrana citoplasmática inducida por Enterocina CRL35 requeriría del anclaje en la membrana celularBarraza D, Chalon MC, Acuña L, Minahk CJ, Bellomio A. INSIBIO (CONICET-UNT). Inst. de Quimica Biologica. Fac. de Bioqca. Qca. y Fcia UNT. E-mail: dbarraza@hotmail.es Introducción: Enterocina CRL35 es una bacteriocina tipo pediocina (subclase IIa) producida por Enterococcus mundtii CRL35. Las bacteriocinas subclase IIa actúan destruyendo la integridad de la membrana citoplasmática a través de la formación de poros de naturaleza desconocida. Al parecer, los péptidos se unen a la membrana citoplasmática a través de un receptor específico, la proteína manosa permeasa y existen dos teorías sobre el mecanismo de formación del poro: i) inducirían un cambio conformacional en el receptor para pasar a un estado de canal proteico siempre abierto o, ii)usarían al receptor como anclaje para formar el poro insertándose en la membrana fosfolipídica. Objetivo: Estudiar el mecanismo de acción por el cual enterocina CRL35 induce la pérdida de la integridad de la membrana plasmática. Para ello dirigimos la bacteriocina a la membrana celular de E. coli, fusionándola con la proteína de membrana EtpM perteneciente al sistema de secreción tipo II de E. coli O157:H7. Materiales y métodos: Mediante técnicas de biología molecular se contruyó la fusión etpM-munA en el plásmido p8760, el cual está bajo el control de un promotor inducible por arabinosa y se transformó en E. coli, una bacteria Gram (-) que no expresa la proteína receptora y por lo tanto es resistente al antimicrobiano. Resultados y conclusiones: La fusion EtpM-MunA impide el crecimiento de E. coli, cuando se induce su expresión con arabinosa. Por primera vez se observó que enterocina CRL35 es capaz de actuar sobre bacterias Gram negativas cuando se la ancla en la membrana citoplasmática indepentientemente de su receptor específico.