Defensinas de flores de Silybum marianum con potencial aplicación antimicrobiana

AGUSTINA FERNÁNDEZ; MARIA LAURA COLOMBO

La Plata

Congreso; XXIII Jornadas de Jóvenes Investigadores; 2015

Grupo Montevideo

Las defensinas vegetales son péptidos básicos ricos en cisteína de 45 a 54 aminoácidos y estructura conservada. A pesar de su similitud estructural presentan diversidad de secuencias, lo cual puede dar cuenta de las diferentes funciones atribuidas (actividad antibacteriana, antifúngica, etc).Los objetivos del presente trabajo fueron: clonar a partir de flores una nueva defensina con potenciales aplicaciones biotecnológicas y realizar un modelo molecular por homología empleando herramientas bioinformáticas.A partir de flores de Silybum marianum (L.) Gaertn. (Asteraceae) cosechadas en primavera se extrajo el ARN total. Se obtuvo el ADNc por retrotranscripción y se amplificó empleando cebadores específicos. El producto de amplificación fue clonado en el vector pGEM-Teasy y transformado en bacterias de E. coli XL1-Blue. El ADN plasmídico fue analizado por digestión para confirmar la presencia del inserto, y posteriormente secuenciado. Las secuencias obtenidas fueron analizadas empleando herramientas bioinformáticas.El análisis de la secuencia completa de la defensina, reveló que codifica para una proteína con un dominio defensina (DefSm-D) y un dominio C-terminal rico en prolina. A partir de DefSm-D se realizó un modelado molecular utilizando el programa MODELLER. El modelo tridimensional permitió corroborar el plegamiento característico de las defensinas. También se identificó la región conservada ϒ-core, que estaría vinculada con la actividad antifúngica de muchas defensinas.