Polisacáridos de la pared celular del alga roja Nemalion helminthoides. Estructura y actividad antiviral in vitro

PEREZ RECALDE MERCEDES; PUJOL, C A; DAMONTE, ELSA; MATULEWICZ, M C

Puerto Madryn, Argentina

Jornada; VI Jornadas de Ciencias del Mar; 2006

universidad de la Patagonia

Los polisacáridos sulfatados de algas poseen en mamíferos actividades biológicas/farmacológicas de interés. Ciertos polisacáridos de pared celular de algas rojas marinas son activos contra virus envueltos, tales como Herpes simplex (HSV). En este trabajo se estudiaron polisacáridos de la pared celular del alga roja Nemalion helminthoides, recogida en Miramar (Buenos Aires, Argentina). El alga se sometió a tres extracciones sucesivas con agua a 90ºC (E1 - E3). E2 se fraccionó con cetrimida para dar una fracción soluble y un precipitado que se disolvió en NaCl 4M. La fracción soluble se purificó por cromatografía de intercambio dando una fracción neutra y otra sulfatada. Las fracciones se analizaron: se determinó el contenido en hidratos de carbono, proteínas, y sulfato, la composición en monosacáridos por cromatografía gaseosa, y el peso molecular. También se estudiaron por RMN y la fracción neutra por metilación. Se evaluó la actividad contra HSV-1(F) por ensayo de reducción de placas virales. Monocapas de células Vero fueron infectadas con 40-50 UFP de virus/pocillo en ausencia o presencia de distintas concentraciones de las fracciones. Luego de una hora de adsorción a 37°C, se retiró el inóculo y se cubrió con medio más metilcelulosa 0,7%. Tras 48 horas a 37°C, se contaron las placas de lisis y se calculó la concentración de compuesto requerida para reducirlas en un 50% (CI50). Los resultados obtenidos hasta el momento sugieren la presencia de mananos sulfatados. El producto con mayor actividad antiviral fue E3 con una CI50 de 5,0 μg/mL; las CI50 de E2 y E1 fueron 16,5 y 35,5 μg/mL, respectivamente. Las subfracciones de E2 con menor grado de sulfatación presentaron mucha menor actividad antiviral (CI 50 > 400 μg/mL) Dado los resultados obtenidos, sería relevante estudiar la actividad de los compuestos in vivo en animales infectados con virus. También, lograr la desproteinización total de los extractos para adjudicar la actividad unívocamente a los polisacáridos.