PERSONAL DE APOYO
KELLER Leticia
congresos y reuniones científicas
Título:
Activación de p38 inducida por plasma normal de hombre y testosterona
Autor/es:
POWAZNIAK Y; KEMPFER A C; MARCHESE C; FARIAS CE; KELLER L; DOMINGUEZ M P; CALDERAZZO JC; LAZZARI MA
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; SAIC; 2006
Resumen:
ERK es una integrante de la familia de MAPK que media un efecto protector en las células. Dentro de la familia, existe la p38 que promueve la muerte celular. Nuestro objetivo es avanzar en los conocimientos del tema respecto a la influencia de las hormonas determinantes del sexo con la respuesta (apoptosis/angiogénesis) de las HUVEC. Se realizaron estudios a nivel proteico donde se evaluaron los efectos del plasma normal (PN) de hombre (PNH), PN de mujer (PNM), PN de embarazada (PNE), estradiol (E2) y testosterona (T) en la fosforilación de las MAPK en HUVEC. Para evaluar las posibles vías de activación de las HUVEC, se establecieron los nivelesde activación de las proteínas ER ½ y p 38 por Western blot . Las células fueron homogeneizadas y solubilizadas en buffer Laemmli, en condiciones reducidas. Las proteínas fueron separadas en un gel de SDS-15 % PAGE. El análisis por Western blot se desarrolló utilizando un anticuerpo anti Perk ½ y P- p 38. Las proteínas se revelaron mediante luminiscencia (ECL) y fueron evaluadas por densitometría. Para cuantificar los niveles antigénicos de las muestras, se incubaron las mismas membranas con un anticuerpo anti B-actina. Para evaluar si los tratamientos realizados indujeron apoptosis, éstas fueron evaluadas por la pérdida de ansimetría de los fosfolípidos en la membrana plasmática :Anexina V- isotiocianato fluoresceinado y ioduro de propidio. No se observaron diferencias significativas entre las células tratadas con PNM, PNE y el control en la fosforilación de p- 38 y ERK1/2. Sin embargo, las células tratadas con E2 tuvieron diferencias significativas (p ≤ 0.05) con respecto a la fosforilación de ERK2.La fosforilación de ERK1 no fue afectada por E2. Existen diferencias significativas entre las células tratadas con PNH, T y control en la fosforilación de p-38. Sugerimos que los niveles de testosterona están relacionados con los mecanismos de apoptosis bajo nuestras condiciones experimentales.