Genotipos de Echinococcus granulosus identificados en quistes hidatídicos de bovinos y porcinos

PERLA NEGRO; HORTENSIA MAGARO; MARCELA CUCHER; NATALIA MACCHIAROLI; LAURA KAMENETZKY; LAURA PRADA; LUCAS MALDONADO; MARA ROSENZVIT

Jornada; XV Jornadas de Divulgación Técnico Científicas 2014 ? II Jornada Latinoamericana; 2014

Echinococcus granulosus (Batsch, 1786) es un platelminto cestode que afecta en su estado adulto principalmente a los cánidos y en su forma larvaria, denominada quiste hidatídico (QH), puede hallarse en más de cien especies de mamíferos, entre los que se encuentran integrantes de las familias bovidae y suidae. Dentro de la especie E. granulosus existen variantes genéticas denominadas cepas. Se les ha asignado un genotipo de acuerdo a su caracterización en base a marcadores moleculares independientes (en especial, genes mitocondriales), determinada por variaciones intraespecíficas en la secuencia nucleotídica del segmento de 366 pares de bases del gen mitocondrial citocromo oxidasa subunidad 1 (CO1) y en algunos pares de bases del segmento de 471 pares del gen mitocondrial nicotinamida adenina dinucleótido NADH deshidrogenasa. Los genotipos se denominan de acuerdo al hospedador intermediario en el cual cada variante desarrolla mayoritariamente quistes fértiles (lo que implica presencia de protoescólices). Se reconocen 10 genotipos diferentes designados como: G1 (cepa oveja común), G2 (cepa oveja de Tasmania), G3 (cepa búfalo), G4 (cepa equina), G5 (cepa vaca), G6 (cepa camello), G7 (cepa cerdo), G8 (cepa cérvido), además se ha asignado el genotipo G9 a aislamientos de Echinococcus detectados en casos humanos en Polonia y el genotipo G10 a aislamientos de cérvidos de Finlandia y Suecia2. En la República Argentina se han hallado los genotipos G1, G2, G5, G6 y G71. Identificar la cepa que mantiene el ciclo de E. granulosus, aportaría datos para el conocimiento del curso de la enfermedad, especificidad de hospedador, localización del quiste, monitoreo de las especies involucradas, lo que aportaría significativamente al control de la Echinococcosis Quística. Con el objetivo de caracterizar los genotipos de E. granulosus se analizaron QH de bovinos y porcinos. Los hallazgos de bovinos fueron obtenidos en frigorífico y los de porcinos de faenas domiciliarias. Se realizó diagnóstico de certeza de los QH, identificando membranas cuticular y germinativa como así también arenilla hidatídica. Se determinó fertilidad/infertilidad de los QH mediante la presencia/ausencia de protoescólices (PE). Se categorizaron los QH de acuerdo a la fertilidad, si en una muestra de líquido XV Jornadas de Divulgación Técnico Científicas 2014 ? II Jornada Latinoamericana Facultad de Ciencias Veterinarias ? Universidad Nacional de Rosario hidatídico se contaban entre uno y cinco PE por campo de 10x en microscopio óptico se lo consideró de baja fertilidad, si se contaban más de 5 y hasta 10 PE, de mediana fertilidad y si se contaban más de 10 PE se consideró un quiste de alta fertilidad. Las muestras para análisis moleculares se acondicionaron en alcohol 70 y posteriormente se analizaron mediante secuenciación de CO1 previamente amplificado mediante PCR (reacción en cadena de polimerasa). Se procesaron 19 QH, 15 correspondieron a la especie bovina y 4 a la porcina. La identificación molecular de los QH bovinos correspondió en un 46,7% (7/15) al genotipo G1 (cepa oveja), un 20%(3/15) al genotipo G1/G2 variante (Cepa oveja y cepa oveja de Tasmania) y un 33,3% (5/11) al genotipo G5 (cepa vaca). En los quistes porcinos el 100% correspondió al genotipo G7 (cepa cerdo).Teniendo en cuenta la fertilidad relacionándola con el genotipo, los quistes bovinos genotipo G1 y G1/G2 resultaron ser de mediana a baja fertilidad y los genotipos G5 en un 60% tuvieron alta fertilidad. Todos los quistes porcinos genotipo G7 presentaron una alta fertilidad. En cuanto al lugar de origen de los bovinos, cinco procedían de la provincia de Santa Fe (departamentos Castellanos y San Cristóbal), cuatro de la provincia de La Pampa (Departamento Guatraché), uno de Entre Ríos (departamento Diamante) y uno de la provincia de Buenos Aires ( Partido de Lincoln). No fue notificada la procedencia de cuatro animales. En cuanto a los cerdos, tres provenían de zonas rurales del sur de la provincia de Santa Fe y uno de la provincia de Entre Ríos (departamento Diamante). En las muestras de bovinos de la provincia de Santa Fe se identificaron los genotipos G1, G1/G2 y G5, en las de la provincia de La Pampa y Entre Ríos se determinó el genotipo G1 y en la única muestra procedente de la provincia de Buenos Aires G1/G2 variante. En el presente trabajo se identificaron las cepas G1, G5, G7 y G1/G2 variante (en éste último caso, probablemente, estos polimorfismos hallados sean parte de la variación natural que hay en individuos de una misma población). Las cepas G1, G2 y G5 han sido detectadas también en humanos en nuestro país, confirmando el valor antropozoonótico de E. granulosus; en cambio, la cepa G7, que sólo se encontró en perros y cerdos constituiría un ciclo enzoótico donde el ser humano, hasta el momento, estaría ausente. La estructura de la población genética de E. granulosus es compleja y las características de la diversidad entre las distintas regiones debería ser considerada como una herramienta más al momento de realizar programas de control de la enfermedad.