“Test molecular para Chagas neonatal: desafíos del diseño en función de los escenarios clínicos y productivos posibles”

CARRILLO, CAROLINA; STOLOWICZ FABIANA; LAROCCA LUCIANA; VOJNOV ADRIAN; WERBAJH SANTIAGO

Mendoza

Congreso; XI CONGRESO SAP; 2022

Las enfermedades infecciosas causan gran impacto en la salud pública y la productividad. En salud humana el acceso a un diagnóstico oportuno es un derecho que puede hacer la diferencia entre salud y morbimortalidad. Existe una vacancia en métodos de diagnóstico adaptados al sujeto en estudio, tipo de muestra y agente infeccioso, pero además a las posibilidades de usuarixs, beneficiarixs y escenarios reales. Nuestro OBJETIVO GENERAL es desarrollar y transferir tests efectivos, asequibles y de uso posible en toda condición para la detección de agentes infecciosos. En el año 2013 recibimos un subsidio FONARSEC (ANPCyT) para desarrollar un kit de diagnóstico, basado en Loop-mediated isothermal amplification (LAMP), para Chagas en población neonatal. En Argentina nacen por año ~1.400 niñxs infectadxs. La detección precoz es fundamental para un tratamiento efectivo; sin embargo, sólo se identifica un ~25% de los casos anuales. Para abordar dicho problema, desarrollamos un test (el “Chagas NeoKit”) capaz de detectar 1 copia del templado de ADN de Trypanosoma cruzi por reacción; con total reproducibilidad por encima del límite de detección (un parásito) establecido por ensayos de repetitividad. El kit reconoce las 6 Unidades Discretas de Tipificación de T. cruzi y no presenta reacción cruzada con otros genomas, tanto de organismos relacionados filogenéticamente como contaminantes de la muestra. El kit fue diseñado para funcionar directamente con una muestra universalizada en la atención neonatal: la tarjeta de Pesquisa Neonatal (PPN); también pueden usarse sangre y ADN. Sólo se requiere el uso de un dispositivo térmico; no son necesarias pipetas, centrífugas ni otros equipos de laboratorio y la lectura del resultado es simplificada por tiras reactivas “lateral flow dipsticks” (LFD). Definida la configuración del kit, se evaluó su estabilidad y, por otro lado, su desempeño clínico en colaboración con los Hospitales Durand y Ramos Mejía (CABA) y Perrando (Resistencia, Chaco). Así, el Chagas Neokit fue el primer reactivo de detección molecular argentino aprobado por ANMAT (2017). Elaboramos los Procedimientos Operativos Estandarizados (POE) para la producción industrial a escala del kit, se produjo un lote piloto de 400 reacciones y se inició un estudio clínico ampliado, en colaboración con Ministerio de Salud de la Provincia de Chaco (Mayo 2019). Capitalizando la experiencia creamos la Plataforma Tecnológica de Amplificación Molecular Isotérmica “AMI” y replicamos el proceso de desarrollo para otros agentes infecciosos -con distinto grado de avance-, destacándose el NeoKit COVID-19 (ANMAT, Mayo 2020). Este trabajo permitió transformar una reacción in vitro en un producto transferido a la industria; realizar presentaciones de propiedad intelectual nacional e internacionales; e instalar una empresa de base tecnológica para la producción de kits. Esperamos que esta experiencia motive a colegas a transferir sus conocimientos para el desarrollo tecnológico y social.