Validación analítica y biológica de una técnica no invasiva para la cuantificación de glucocorticoides en guanacos Lama guanicoe

PANEBIANCO ANTONELLA; GREGORIO PABLO; RUPER PALME; OVEJERO AGUILAR RAMIRO; MAROZZI ANTONELA; TARABORELLI PAULA; LEGGIERI LEONARDO RAMÓN; CARMANCHAHI PABLO

Puerto Madryn

Congreso; XXXII JAM; 2019

SAREM

El eje hipotalámico-hipofisario-adrenal regula en los vertebrados numerosas vías endócrinas relacionadas con el balance y la movilización de energía, entre ellas la secreción de glucocorticoides como el cortisol. El uso de técnicas no invasivas para cuantificar hormonas esteroideas en heces ha permitido realizar estudios a largo plazo, evitando la manipulación de los individuos en el momento de tomar la muestra, pero para poder utilizarlas resulta fundamental validarlas. Nuestro objetivo fue realizar una validación analítica y biológica de una técnica no invasiva utilizando un enzimainmunoensayo (EIA) para cuantificar la concentración de metabolitos fecales de cortisol (MFC) en guanacos. Para ello, desarrollamos un experimento de estrés a través de restricción física en dos machos adultos en cautiverio. Los animales fueron inmovilizados durante 15 minutos (estímulo estresor) y luego, fueron liberados en dos corrales separados con agua y comida ad libitum. Se tomaron muestras fecales de cada animal antes del estímulo y en los subsiguientes cinco días. Para estimar la concentración de MFC, se utilizaron anticuerpos específicos de grupo desarrollados para la cuantificación de estos metabolitos (3α, 11oxo-A EIA). Para la validación analítica, construimos curvas de paralelismo y calculamos los coeficientes de variación intra e inter-ensayo. Los datos se analizaron utilizando modelos lineales. Los resultados mostraron que las concentraciones de MFC aumentaron 12h después del estímulo, alcanzando valores máximos entre las 30 y 36h. Las concentraciones de MFC de ambos animales se mantuvieron elevadas hasta las 72h y, finalmente, disminuyeron hasta niveles basales similares a los previos al estímulo. Los resultados mostraron que el EIA utilizado es lo suficientemente sensible como para detectar cambios fisiológicos significativos en la secreción de metabolitos fecales de glucocorticoides y, por lo tanto puede ser utilizado como una herramienta útil para estudiar tanto la variación estacional de estas hormonas como para cuantificar posibles eventos estresantes en esta especie.