Caracterización de la actividad del coactivador TIF-2 sobre GR y NF-kB

IGNACIO M. NOJEK, LORENA FRANCO, LUCIANA TONELLI, MONICA A. COSTAS

Mar del Plata

Congreso; Sociedad Argentina de Investigaciones Clinicas; 2001

En trabajos anteriores propusimos un mecanismo de antagonismo entre citoquinas y glucocorticoides por competencia en la unión a coactivadores de GR y NF-kB. Demostramos que los coactivadores de la familia p160 del GR también son coactivadores de NF-kB, promoviendo la actividad transcripcional de ambos factores, en forma dosis coactivador dependiente. Con el objeto de determinar si TIF-2, un coactivador de GR y NF-kB, constituye una molécula por la cual compitan ambos factores, o bien podría formar parte de un complejo capaz de aumentar la transactivación por ambos factores, se analizó 1) dominios de TIF-2 involucrados, transfectando células HeLa con vectores conteniendo deleciones del coactivador y 2) si además de la actividad histona acetil transferasa previamente descripta para estos coactivadrores existía alguna otra actividad enzimática asociada. Se observó 1) que determinados dominios del coactivador aumentan la actividad transcripcional de uno y no la del otro factor, 2) que TIF-2 recluta actividad quinasa, ya que inmunoprecipitados con anticuerpos específicos para TIF-2 presentan un patrón específico de bandas cuando es incubado con ATP marcado radioactivamente. Esto sugiere que de existir competencia entre GR y NF-kB por la unión a TIF-2, los dominios requeridos son diferentes y no se descarta la formación de complejos conteniendo: TIF-2/GR/NF-kB. Los complejos llevando TIF-2 reclutan actividad quinasa, posiblemente involucrada en la regulación de la transcripción