Identificação de genes possivelmente expressos nos passos iniciais da infecção do dermatófito Trichophyton rubrum e suas relações com a via de sinalização do pH extracelular

SILVEIRA HC; GRAS DE; SANCHES PR; ROSSI A; MARTINEZ-ROSSI NM

Águas de Lindóia - São Paulo

Congreso; 53º Congresso Brasileiro de Genética; 2007

Sociedade Brasileira de Genética

Nos dermatofitos como o T. rubrum, muitos fatores contribuem para a patogenicidade, dentre eles, a capacidade de se instalar no ambiente acido da pele. Assim, para ser bem sucedido, o dermatofito precisa ter capacidade aderente, germinacao e penetracao rapida das hifas e, portanto, dispor de uma maquinaria metabolica que atue de forma eficiente em pH acido. Com o objetivo de identificar genes supostamente expressados nos passos iniciais da infeccao, foi construida uma biblioteca de hibridacao subtrativa utilizando o cDNA da linhagem H6 cultivada em pH 5,0 como tester e em pH 8.0 como driver. Foram obtidos 480 clones, dos quais 234 foram confirmados por reverse Northern Blot como diferencialmente expressos em pH acido. Os transcritos revelaram ampla diversidade, quando classificados funcionalmente, estando envolvidos em 13 processos celulares diferentes, como por exemplo, metabolismo, defesa e virulencia, sintese de proteinas e transporte celular. Desses, foram validados por Northern Blot, os genes que expressam as enzimas carboxipeptidase S1, acetamidase, aconitase, acetamidase, fatty acid desaturase e a proteina 60S ribossomal L10. Nesses experimentos, tambem foi utilizada uma linhagem de T. rubrum com o gene pacC rompido. O gene pacC codifica uma proteina homologa ao regulador transcricional PacC/Rim101 da conservada via de sinalizacao do pH. O transcrito que codifica a fatty acid desaturase, apresenta uma elevada expressao na linhagem mutante em pH 5,0 e pH 8,0. Essa enzima e envolvida na sintese de acidos graxos insaturados na membrana plasmatica e no controle da homeostase celular, importante na resposta adaptativa dos fungos frente a fatores ambientais. Assim, esses estudos sugerem que o fator de transcricao PacC pode regular alguns genes da maquinaria metabolica essencial para o processo inicial da infeccao.