Identificação de genes do dermatófito Trichophyton rubrum envolvidos no sensoriamento do pH alcalino

CAZZANIGA RA; SILVEIRA HC; GRAS DE; SANCHES PR; MAZUCATO M; MARTINS MD; ROSSI A; MARTINEZ-ROSSI NM

Salvador - Bahia

Congreso; 54º Congresso Brasileiro de Genética; 2008

Sociedade Brasileira de Genética

Trichophyton rubrum é um fungo dermatófito com maior prevalência em isolados clínicos humanos. Esses fungos possuem habilidade para invadir tecidos queratinizados como pele, cabelo e unhas. Na progressão da infecção, os dermatófitos crescem acentuadamente utilizando como fonte de carbono e nitrogênio, substratos queratinizados. Para isto, secretam enzimas proteolíticas como, queratinases e fosfatases, importantes para o sucesso da instalação e permanência no hospedeiro. Além disto, o crescimento de T. rubrum é dependente do pH ácido inicial do meio. Durante o crescimento do cultivo, o pH torna-se alcalino, produzindo um ambiente no qual a maioria das proteases tem atividade ótima. Portanto, o dermatófito necessita dispor de uma maquinaria metabólica que atue de forma eficiente no sensoriamento do pH ambiente, e na manutenção do pH alcalino durante o seu desenvolvimento e crescimento. Com o objetivo de identificar genes diferencialmente expressos supostamente envolvidos no monitoramento do pH alcalino em T rubrum, foi construída uma biblioteca de hibridação subtrativa utilizando o cDNA da linhagem H6 cultivada em pH 8,0 como tester e em pH 5.0 como driver. Foram obtidos 1152 clones, dos quais 231 foram confirmados por differential screening, como diferencialmente expressos em pH alcalino. As seqüências, agrupadas pelo programa CAP3, formaram 26 contigs e 143 singlets (169 unigenes). Análises por BLASTX revelaram que 77% de seqüências apresentam similaridade com proteínas depositadas no GenBank. Os transcritos revelaram ampla diversidade, quando classificados funcionalmente, estando envolvidos em 15 processos celulares diferentes, como por exemplo, transcrição, síntese de proteínas, defesa e virulência, transporte intracelular e metabolismo celular. Esses resultados contribuem para a elucidação em T. rubrum da resposta ao pH extracelular e de mecanismos regulatórios envolvidos na instalação e manutenção da interação patógeno-hospedeiro.