PRODUCCION DE EMBRIONES EN CEPAS DE RATAS DE INTERES BIOMÉDICO

JUAN DE PAZ, LEONARDO; GONZALES, FOC; GUSTAVO F. CHAPO; ROBERT, MARIA CELESTE

Rosario

Jornada; Jornadas de Ciencia, Tecnología e Innovación 2022; 2022

UNR

Resumen:El Centro de Investigación y Producción de Reactivos Biológicos (CIPReB) de la Facultad de Ciencias Médicas de la UNR mantiene en producción diferentes cepas especiales de ratas, que constituyen modelos experimentales de: Diabetes tipo II (cepa IIM/Fm eSS), Obesidad (cepa IIM/Fm β), Chagas (cepa IIM/Fm L), Eumetabólica (cepa IIM/Fm e y cepa IIM/Fm b ). Estas cepas son líneas endocriadas derivadas de un núcleo fundador establecido en el año 1948 y que, a su vez, derivan de la colonia de animales de Bernardo Houssay establecida en 1927 e importadas desde Europa en 1917. El mantenimiento en el tiempo de estas cepas especiales, patrimonio de la UNR, requiere una serie de esfuerzos económicos, de espacio, infraestructura, recursos humanos e incluso aspectos de carácter bioético que pueden ser reducidos mediante la criopreservación de embriones. El desarrollo de un programa de criopreservación de embriones en estadio pre-implantación y su implementación en cepas de rata de interés biológico requiere de la puesta a punto de un grupo de técnicas accesorias, entre las cuales se encuentran las relacionadas con la reproducción de los animales. La obtención de embriones de buena calidad y en número suficiente es un requisito fundamental para asegurar la recuperación de la colonia a partir de los mismos. En el presente trabajo se exponen los resultados de la evaluación de un protocolo de estimulación hormonal de la ovulación (Superovulación) con el objetivo de evaluar su efecto sobre el número y la calidad de los embriones obtenidos y compararlos con los resultados obtenidos sin estimulación (Grupo Control). Al mismo tiempo se buscó determinar si existen diferencias en función de la cepa de animal utilizada. Se utilizó un protocolo de estimulación, obtenido de la literatura, a partir del uso de las hormonas PMSG (Gonadotropina sérica de yegua preñada) y hCG (Gonadotropina coriónica humana) en diferentes dosis evaluando el número de animales servidos (S+), el número de animales preñados (P+) y el número y calidad de embriones obtenidos a 5 días post-servicio. La reproducción natural (Grupos Control) y el procesamiento a 5 días post servicio, permitió aislar entre 5 y 7 embriones por animal preñado lo que supone un número menor al esperado en función del tamaño normal de las camadas (entre 8 y 12 crías). A su vez, se observó una alta dispersión de estadios (4 células, 8 células, mórulas y blastocistos) encontrados. En cuanto a la estimulación hormonal, excepto en el caso de animales pre-púberes de la cepa IIM/FCM b, la estimulación hormonal no solo no arrojó los resultados esperados, sino que parece incluso “bloquear” la ovulación o la fecundación, ya que no se obtuvieron embriones en ninguno de los animales tratados. En el caso mencionado de los animales pre-púberes de la cepa IIM/FCM b, los embriones obtenidos no mostraron buena calidad. Estos resultados parecen indicar que las cepas en estudio no responden como se esperaría a un protocolo de estimulación hormonal por lo que se requiere continuar evaluando distintos aspectos tanto del manejo de los animales (momento del ciclo, edad, esquema de estimulación) como de la técnica de obtención de los embriones (momento de la obtención, técnica de lavado del cuerno uterino) para obtener los resultados buscados.