PERSONAL DE APOYO
CAO Gabriel Fernando
congresos y reuniones científicas
Título:
PROCESAMIENTO DE INSULINA EN MITOCONDRIAS-SU DEGRADACIÓN
Autor/es:
CAMBEROS M; CAO G; MARTUCCI L; CRESTO J
Lugar:
Mar del Platra
Reunión:
Congreso; LIV REUNION CIENTIFICA DE LA SOCIEDAD ARGENTINA DE INVESTIGACION CLINICA (SAIC); 2009
Resumen:
Nosotros observamos que la enzima degradante de insulina(EDI) se encuentra en la matriz mitocondrial y posee actividaddegradante de insulina. Objetivos - Demostrar que las mitocondriasregulan y degradan la incorporación de insulina. Métodos- EDI se obtuvo de músculo de rata por sucesivos pasoscromatográficos. Mitocondrias hepáticas aisladas según Parson,fueron recuperadas e incubadas a 25°C o 30°C, oxígeno 100%,125I-insulina (105 cpm) e insulina fría a tiempos y dosis variables.La reacción se detuvo con N-etilmaleimida 1 mM y los mitoplastos(M) se aislaron de la membrana externa y espacio intermembranacon digitonina. La degradación se estudió por cromatografía enSephadex G50 Superfino con elusión en ácido acético 1 M. Lainsulina se detectó por su posición cromatográfica y conanticuerpos específicos. Resultados - A 30°C la degradación deinsulina fue mucho mayor que a 25°C. A 25°C EDI acumulainsulina en M hasta los 300 seg. A 30°C la acumulación en M(control y EDI) fue similar pero la degradación fue mayor con EDI.En el basal a 30°C la degradación en el buffer de incubaciónmitocondrial fue total (tiempo experimental "0") con un pico detirosina. Esto es, toda la insulina fue captada y degradada en formacasi instantánea. Estudios dosis/respuesta con dosis crecientesde insulina (1 ng a 10 μg) mostraron que dosis farmacológicasde insulina saturan parcialmente el sistema de transporte y degradación.N-ethilmaleimida 0,1 mM incrementó la internalizaciónmitocondrial (Mitocondrias, Control: NS, EDI P
rds']