Variantes del virus herpes simples tipo 1 seleccionadas por un polisacárido sulfatado: acción citopática y patogénica

MATEU C, PEREZ RECALDE M, PUJOL C, DAMONTE E, CARLUCCI J

Vaquerías, Córdoba, Argentina

Simposio; XXVII Reunión Científica Anual; 2007

Sociedad Argentina de Virología

Herpes genital es considerado de importancia en salud pública por la creciente prevalencia de la infección y de la enfermedad, la transmisión durante los períodos asintomáticos, el impacto en la sociedad con relación al manejo de las secuelas físicas y psicológicas en adultos, y las serias amenazas de vida en la enfermedad neonatal resultante de la transmisión vertical. Como es la causa más común de ulceras genitales en países desarrollados, es tambien un importante co-factor en la transmisión de la infección del HIV. No obstante, aún no se ha encontrado una vacuna efectiva para el control de la propagación del herpes. Los polisacáridos sulfatados, con estructuras químicas similares al heparan sulfato celular, fueron identificados como potentes y selectivos inhibidores de HSV-1 y HSV-2. Su mecanismo de acción afecta principalmente la etapa de adsorción viral, interactuando con las glicoproteínas de superficie. Sabiendo que el uso frecuente de antivirales genera resistencia, se logró la obtención in vitro en células Vero de variantes virales de HSV-1 cepa F empleando concentraciones crecientes de un carragenano (1C3), actualmente en fase II/III de tratamiento clínico como microbicida. Las variantes clonadas mostraron diferencias en las características citopáticas, resistencias a las drogas y virulencia. Las variantes estudiadas 1C3 syn13-8 y 1C3 syn14-1 mostraron variabilidad en la acción citopática, dependiendo del tipo celular ensayado. En cultivos primarios murinos de pulmón y vagina generaron sincicios mientras que la cepa salvaje mostró los típicos redondeamientos celulares. De igual manera se evaluó la susceptibilidad de las variantes a distintos tipos de compuestos por ensayo antiviral de reducción de la acción citopática, mostrando 1C3 syn13-8 ser sensible a la heparina y a 1C3, mientras que 1C3 syn14-1 mostro  resistencia a ambos compuestos con valores 5,7 y 4,5 veces mayores respectivamente en relación a la cepa patrón (concentración inhibitoria 50% (CI50) de 1,25 mg/ml para la heparina y de 1,4 mg/ml para 1C3). También mostraron cambios de patogenicidad in vivo dependiente de la vía de inoculación. Asi, por vía intravaginal 1C3 syn 13-8 y 1C3 syn 14-1 generaron 60% y 0% de mortalidad respectivamente, en comparación con el 93,3% del control (HSV-1(F)). Con el fin de determinar alguna diferencia en la respuesta inmune adaptativa se inmunizaron ratones Balb/c con las dos cepas. Los sueros de animales inmunizados con las variantes virales en estudio presentaron anticuerpos que neutralizaron de igual manera las cepas control HSV-1(F) y 1C3 syn 14-1, utilizando la metodología de plaqueo directo. Asimismo los animales inmunizados fueron desafiados con las cepas en estudio, no mostrando síntomas de enfermedad. Conclusiones: Podríamos inferir con los resultados expuestos que a mayor resistencia viral a las drogas, menor es la patogenicidad en  mucosa vaginal intacta. Asimismo estas variantes virales mustran que el fenotipo sincicial no estaría relacionado con la patogenicidad observada in vivo. Ademas, no se observan diferencias significativas en los anticuerpos neutralizantes generadas por ambas cepas. Un estudio mas detallado de este tipos de variantes nos permitirá definir su potencial uso terapéutico.