INVESTIGADORES
CARLUCCI Maria Josefina
congresos y reuniones científicas
Título:
Variantes del virus herpes simplex tipo 1 disminuyen la respuesta de citquinas proinflamatorias
Autor/es:
ARTUSO MC, MATEU CG, GAZZANIGA S, PUJOL CA, WAINSTOK R, CARLUCCI MJ
Reunión:
Congreso; X Congreso Argentino de Virologia; 2011
Resumen:
El virus Herpes simplex tipo 1 (HSV-1) es un virus ADNdc envuelto que infecta c¨¦lulas epiteliales, pudiendo establecer una infecci¨®n latente en neuronas sensoriales. La reactivaci¨®n del virus puede causar enfermedad tanto en individuos inmunocompetentes como en inmunodeficientes produciendo desde la diseminaci¨®n de la infecci¨®n hasta neumon¨ªas y encefalitis. Las infecciones por HSV-1 generan una respuesta antiviral multifac¨¦tica, requiriendo la participaci¨®n de la inmunidad innata y adaptativa. Con el objetivo de estudiar la respuesta temprana de citoquinas proinflamatorias propia de la patolog¨ªa herp¨¦tica, se emplearon variantes virales sinciciales (syn14-1 y syn17-2) seleccionadas bajo presi¨®n de selecci¨®n con el carragenano m/n 1C3. Los carragenanos poseen una estructura qu¨ªmica similar al heparan sulfato, receptor celular de ingreso del HSV, que le confiere una potente acci¨®n antiherp¨¦tica por competencia con dicho receptor. Debido a que los macr¨®fagos son  productores de citoquinas y participan activamente en el inicio de la respuesta inflamatoria contra la invasi¨®n viral, se evalu¨® la respuesta a la infecci¨®n de macr¨®fagos in vitro. Tambi¨¦n mediante estudios realizados in vivo, se compararon dos v¨ªas naturales de entrada viral: intranasal e intravaginal. Con dicho fin, se analiz¨® el efecto de la cepa control HSV-1 (F) y las syn sobre los niveles de citoquinas (IL-6, TNF-¦Á, INF-¦Á e IL-10). Para ello se infectaron macr¨®fagos peritoneales murinos y de la l¨ªnea celular RAW 264.7. A distintos tiempos post-infecci¨®n, se cosecharon las monocapas celulares y los sobrenadantes para el an¨¢lisis de las citoquinas mediante las t¨¦cnicas de PCR y ELISA, respectivamente. La transcripci¨®n de dichas citoquinas en las c¨¦lulas infectadas con las variantes virales fue significativamente menor respecto de la cepa patr¨®n F. Estos resultados se correlacionaron con los obtenidos por ELISA donde se observ¨® una disminuci¨®n de IL-6 y TNF- ¦Á del 80% aproximadamente (p<0,001 en ambos casos). Los estudios in vivo demostraron una patogenicidad aumentada en infecciones intranasales y disminu¨ªda en infecciones intravaginales respecto del control. Los resultados de citoquinas en lavados vaginales se correlacionaron con los obtenidos en las infecciones in vitro. Para analizar si este efecto se generaba tambi¨¦n a nivel pulmonar, se realizaron lavados bronquioalveolares y se analizaron por ELISA. Los resultados demostraron una liberaci¨®n tard¨ªa de las citoquinas proinflamatorias en ratones BALB/c infectados con las variantes virales. Asimismo, se estudi¨® el reclutamiento de c¨¦lulas del sistema inmune en infecciones pulmonares por citometr¨ªa de flujo donde se observ¨® disminuci¨®n en la poblaci¨®n de natural killers activadas en ratones infectados con la variante syn 17-2. Estos resultados demuestran que las variantes syn presentan una activaci¨®n proinflamatoria reducida y/o demorada respecto de la cepa patr¨®n F de HSV-1. Por lo tanto, este tipo de variantes podr¨ªan ser empleadas para profundizar estudios en inmunopatolog¨ªa viral.