EVALUACIÓN CUALITATIVA DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA MICOLÍTICA DE LA CEPA TRICHODERMA KONINGIOPSIS POS7

AMERIO N. S.; SOAREZ J. N.; PEDROZO T.; CASTRILLO M. L.; BICH G. A.; ZAPATA P. D.; VILLALBA L. L.

CORRIENTES

Taller; I Reunión sobre el Manejo de Plagas y Agentes de Control Biológico del Nordeste Argentino y II Taller de Manejo de Malezas y Plantas Invasoras: El control biológico como alternativa; 2018

La problemática que conlleva el uso intensivo de fungicidas químicos en la agricultura, ha impulsado la búsqueda de métodos alternativos de control de enfermedades que sean efectivos, eco-amigables e inocuos para el ser humano. El género Trichoderma secreta enzimas micolíticas responsables de la hidrólisis de los principales componentes de las paredes celulares de los hongos patógenos. Por lo tanto, el conocimiento acerca del comportamiento de las enzimas micolíticas es esencial para su uso efectivo en el control biológico de hongos fitopatógenos. Como objetivo del presente trabajo se propuso determinar cualitativamente el potencial hidrolítico de las enzimas micolíticas de la cepa T. koningiopsis POS7, nativa de la provincia de Misiones y seleccionada pornuestro grupo de trabajo por presentar una elevada actividad biocontroladora in vitro. La determinación de la actividad micolítica general se determinó mediante ensayo cualitativo en medio sólido compuesto por Mandels como complejo nitrogenado, agar 1,5 % y paredes celulares de los hongos fitopatógenos (Botrytis sp., Alternaria sp., Fusarium sp., Verticillium sp.,Macrophomina sp. y Lasiodiploidia sp.) como fuentes de carbono. La actividad quitinolítica se evaluó en medio sólido compuesto por Mandels, agar 1,5 % y quitina coloidal 0,15 %, como única fuente de carbono. La actividad celulolítica se evaluó en medio sólido compuesto por Mandels, agar 1,5 % y carboximetilcelulosa 0,5 % (CMC) como única fuente de carbono. Todos los medios de cultivo se esterilizaron en autoclave durante 15 min a 121 °C y 1 atm de presión superior a la normal y posteriormente se distribuyeron en placas de Petri. El inóculo consistió en un taco de 7 mm de diámetro de la cepa T. koningiopsis POS7 y se incubó a 28 ± 1 ºC a luz continua durante 5 días. El potencial enzimático micolítico y quitinolítico de la cepa T. koningiopsis POS7 se detectó mediante la formación de halos de crecimiento/degradación en toda la placa de Petri durante el período de incubación. La actividad celulolítica se detectó mediante la adición de una solución del colorante azoico rojo Congo al 0,1 %, durante 15 min con agitación suave, y la formación de halos de degradación que se tornaron transparentes debido a la ausencia de CMC. La cepa T. koningiopsis POS7 secreta enzimas hidrolíticas capaces de despolimerizar componentes claves de la pared celular de los hongos fitopatógenos.