Búsqueda de hongos biocontroladores de insectos: identificación morfológica y molecular de una cepa de Metarhizium anisopliae nativa de la provincia de Misiones

BICH G. A.; CASTRILLO, ML; RANDON, DN; RECALDE, ERICA; AMERIO, NS; SILVA, MRV; KRAMER F. L.; VILLALBA LL; ZAPATA PD

Corrientes

Jornada; Jornadas Regionales de Genética; 2016

Metarhizium es un género fúngico biocontrolador de insectos plaga de plantas. Cuando se aísla un agente biocontrolador, es necesaria una correcta identificación, objetivo que usualmente se ve dificultado por especies crípticas con características morfológicas muy sutiles. Por ello actualmente la identificación tradicional por medio de las características morfológicas es complementada por marcadores moleculares que permiten diferenciar entre géneros, especies, cepas e incluso identificar al agente después de su liberación. Los objetivos del presente trabajo fueron aislar e identificar, morfológica y molecularmente, hongos entomopatógenos del género Metarhizium. A partir de muestras de suelo e insectos recolectadas de diversos puntos de la provincia de Misiones, se realizaron siembras en diversos medios de cultivo para lograr su aislamiento. Para la identificación morfológica se consideraron sus características macro-microscópicas; y la extracción de ADN, amplificación por PCR de la región ITS1?5,8S?ITS2, secuenciación de los productos de amplificación y comparación con las bases de datos del National Center for Biotechnology Information (NCBI) y Fungalbarcoding para la identificación molecular. Se alinearon y confeccionaron árboles filogenéticos empleando secuencias del Genbank y el programa Mega 6.0. Se aisló una cepa de hongo entomopatógeno codificada como HEP14 a partir de un insecto con signos de micosis. Las características macro y microscópicas nos permitieron identificarla identificarlo como perteneciente a la especie Metarhizium anisopliae. En las bases de datos moleculares del NCBI y Fungalbarcoding la cepa HEP14 presentó similaridad a nivel de ADN con M. anisopliae. En la evaluación de relaciones filogenéticas la cepa fúngica HEP14 formó un agrupamiento junto a otras cepas de M. anisopliae var. anisopliae con valores de Bootstrap mayores a 97%. Las técnicas de identificación molecular proporcionaron suficiente información para complementar los datos morfológicos y se logró identificar a la cepa fúngica HEP14 como Metharizium anisopliae var. anisopliae.