INVESTIGADORES
FERNANDEZ Pablo Mariano
congresos y reuniones científicas
Título:
Contenido de mARN de acido graso sintetasa en pulmón de rata deficiente en vitamina A
Autor/es:
FERNANDEZ, P; ANZULOVICH, C.; OLIVEROS, LILIANA; GIMENEZ, M. S.
Lugar:
Villa Giardino, Cordoba
Reunión:
Congreso; XXXIII Reunión de la Sociedad Argentina de Investigación Bioquímica, SAIB; 1997
Resumen:
Es conocido que la deficiencia de Vitamina A produce alteraciones morfológicas en pulmón. Por otra parte, la síntesis de ácidos grasos, en particular ácido palmítico, es fundamental para la síntesis de dipalmitoilfosfatidilcolina, principal fosfolípido del surfactante pulmonar. Se consideró de interés estudiar la actividad de la enzima Acido Graso Sintetasa en animales deficientes de Vitamina A. Se trabajó con dos grupos de ratas Wistar, marchos, de 21 días de edad, que recibieron durante tres meses una dieta deficiente en Vitamina A (grupo A-) y la misma dieta con 4000 UI de Vitamina A (control), respectivamente. Al cabo de ese tiempo, los animales fueron sacrificados y los pulmones extraídos. Después de pesados los mismos fueron homogenizados en buffer Tris/HCl pH 7.4, adicionado de DTT, centrifugados a 100000 x g y en el sobrenadante se determinó la actividad de Acido Graso Sintetasa. Los resultados se expresaron en umol de NADPH oxidados/min/mg de proteína. La actividad de la enzima en los animales A- disminuyó respecto a los A+. Posteriomente se procedió a determinar el contenido de mARN para Acido Graso Sintetasa extrayendo el ARN total de pulmón, transfiriendo el ARN a membrana de nylon (Northern blot), e hibridizando con una sonda específica de aproximadamente 800 pb, clonada en el vector p-FAS-5 (Pauslaskis and Sul, BBRC 158, 690-695, 1989), la cual fue marcada con 32P. Los resultados de este análisis, obtenidos por densitometría de las bandas de hibridización, mostraron disminución de la cantidad de mARN de Acido Graso Sintetasa en animales A-. Significancia de los resultados por test de Student para p < 0.05. La vitamina A participaría del mecanismo regulatorio de la síntesis de la enzima Acido Graso Sintetasa en pulmón.
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