Efecto de plaguicidas anticolinesterásicos sobre la actividad de proteína quinasas en embriones y larvas de Chaunus arenarum

FERRARI ANA; LASCANO CECILIA; PECHÉN DE D'ANGELO ANA; VENTURINO ANDRÉS

Congreso; II Congreso Argentino de Sociedad de Toxicología y Química Ambiental (SETAC).; 2008

Los plaguicidas anticolinesterásicos son capaces de inducir estrés oxidativo en embriones del sapo común Chaunus arenarum. El aumento de radicales libres (ROS) puede afectar la vía de señalización celular y la respuesta génica, alterando el desarrollo embrionario. Evaluamos la actividad de proteína quinasas basales, proteína quinasa C (PKC) y proteína quinasa A (PKA) en embriones de C. arenarum en estadio de opérculo completo (OC) luego de la exposición continua desde fertilización al organofosforado metilazinfos (MAz 9mg/L) y al carbamato carbaril (Cb, 20 mg/L), y en larvas (10 días después de OC), expuestas 48 h a MAz (6 mg/L) o Cb (10 mg/L). La actividad quinasa se determinó en sobrenadante de 1000 x g incubando con 32PgATP e histona (basal), más liposomas y calcio (PKC), o más AMPc (PKA). Se analizó el estado redox a través del contenido de glutatión reducido (GSH) como tioles ácido-solubles. Los embriones controles en OC o larvas no mostraron actividad significativa de PKC o PKA por encima de la actividad quinasa basal. La exposición a MAz hasta estadio de OC indujo significativamente la actividad de PKC y PKA respecto a la actividad basal de embriones expuestos (55% y 34% respectivamente), aumentando también la actividad de quinasa basal respecto a controles (217%). El Cb incrementó un 46% y 52% la actividad específica de PKC y PKA, aumentando también la actividad quinasa basal respecto al control (147%). El GSH disminuyó significativamente en OC por exposición a MAz (62%) y Cb (27%). En larvas, la actividad de quinasas no fue afectada significativamente por exposición a los insecticidas si bien se observó la misma tendencia que en estadio de OC, al igual que el contenido de GSH. Es sabido que el aumento de ROS y la disminución de GSH activan a diversas quinasas, entre ellas PKC, quien a su vez participa en la activación del elemento de respuesta antioxidante que controla la expresión de enzimas antioxidantes y detoxificantes como GST. En larvas, la exposición a MAz o Cb durante 48 h no disminuye significativamente el GSH, y en consecuencia tampoco incrementa significativamente la actividad de quinasas. En embriones de C. arenarum, el efecto inductor de MAz sobre las quinasas es mayor que el de Cb y se corresponde con una mayor disminución del GSH y por tanto una situación más severa de estrés oxidativo. De manera similar, hemos observado previamente en embriones que MAz es mejor inductor de la enzima GST que Cb. Podemos concluir que en el desarrollo embrionario de C. arenarum se verifica una correlación entre el grado de estrés oxidativo generado, el estado de activación de proteína quinasas y la respuesta de enzimas detoxificantes, afectando la función celular normal.