LA INMUNIZACION CON VECTORES QUE EXPRESEAN NEF BF GENERA UNA RESPESTA CELULAR ESPECIFICA, CON BAJA REACTIVIDAD CRUZADA FRENTE A LA PROTEINA DEL SUBTIPO B

ANA MARÍA RODRÍGUEZ; MARÍA FERNANDA PASCUTTI; GABRIELA TURK; DANIELA MÓNACO; HORACIO SALOMÓN; MARÍA MAGDALENA GHERARDI

Salta-Argentina

Congreso; Congreso Argentino de SIDA; 2009

SAISIDA

Dentro del desarrollo de vacunas frente a HIV no está claro cuál es el rol de la variabilidad existente entre los distintos subtipos y formas recombinantes del virus. Dado que en Argentina la mayoría de las infecciones están causadas por el subtipo B y la forma recombinante circulante BF, el objetivo de este trabajo fue evaluar la respuesta inmune celular generada, en ratones, a partir de la inmunización con vectores de DNA y MVA que expresan la proteína Nef BF y caracterizar la reactividad cruzada frente a la proteína del subtipo B. MATERIALES Y METODOS: Grupos de 4 ratones de 8 semanas de edad fueron inoculados con una dosis de 100 ug o 3 dosis de 50 ug de DNA Nef BF (Prime) seguidos, en ambos casos, por una dosis de 10e7 PFU de MVA Nef BF (Boost). A los 9 días se evaluó la respuesta celular específica inducida en el bazo, reestimulando los esplenocitos con péptidos solapantes que abarcan la totalidad de las secuencias proteica (B y BF), cuantificando células productoras de IFN-g mediante las técnicas de ELISPOT y citoquinas (IFN-g, TNF e IL-2) en sobrenadante por ELISA. RESULTADOS: Si bien el esquema de una dosis de DNA seguida por una de MVA generó una respuesta específica, esta no fue de gran magnitud y no se detectó respuesta específica frente a los péptidos de Nef B. Con la aplicación de más dosis de DNA en el prime, seguido del boost con MVA, se logró aumentar la respuesta específica, observándose reactividad cruzada frente a la proteína B, aunque entre 3 o 4 veces menor que frente a los péptidos homólogos. CONCLUSIONES: Nef BF resultó ser poco inmunogénica al aplicarse solo una dosis de prime, pero se logró una mayor respuesta aumentando el número de dosis de DNA, lográndose mayor reactividad cruzada frente a la proteína B. Estos resultados son un avance importante en el desarrollo de vacunas que luego se utilizarán en nuestra región.