TNF-α es una de las citoquinas implicadas en la inducción de osteoclastogénesis en la Enfermedad de Gaucher

MUCCI J M; DE FRANCESCO P.; SCIAN R.; DELPINO M.; ROZENFELD P.

Mar del Plta

Congreso; LVI Reunion Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2011

La enfermedad de Gaucher (EG) es una patología genética de almacenamiento lisosomal, causada por la deficiencia de la enzima beta-glucosidasa (GBA). Las manifestaciones óseas incluyen osteopenia y osteonecrosis. La inflamación es un factor clave en la patogénesis de la EG y se ha descripto un aumento de marcadores de resorción ósea en pacientes. Resultados previos de nuestro grupo revelaron la secreción de citoquinas proinflamatorias (pero no de RANKL) y una inducción de osteoclastogénesis por parte de los sobrenadantes de células de nuestro modelo in Vitro de EG (SC). El objetivo es evaluar el papel que desempeña TNF-α en la inducción de osteoclastogénesis en el modelo in vitro de la EG. Las PBMC de controles normales se cultivaron en presencia de Conduritol β-epóxido (CBE), un inhibidor de la GBA, con el agregado de LPS. Los SC se utilizaron para tratar cultivos de monocitos humanos de la línea THP-1 (como precursores de osteoclastos) en presencia de M-CSF. Se determinó la inducción de osteoclastogénesis mediante el conteo de células TRAP positivas multinucleadas y la medida de osteólisis por recuento de sitios de resorción utilizando una matriz ósea comercial, en presencia o no de un anticuerpo neutralizante anti-TNF-α. Se observó un aumento en la cantidad de células TRAP + multinucleadas así como también en el número de sitios de resorción ósea en el tratamiento con CBE y un aumento aun más marcado con el agregado de LPS (p < 0,05). Cuando se agregó al medio de cultivo un anticuerpo neutralizante anti-TNF-α, el número de células multinucleadas TRAP + capaces de resorber matriz ósea se redujo un 50% aproximadamente para cada tratamiento, en forma significativa (p < 0,05). La determinación de citoquinas en los sobrenadantes de cultivo de los osteoclastos diferenciados en medio fresco, reveló un aumento significativo de las tres citoquinas en presencia de SC tratados con LPS y niveles mayores con CBE y LPS, respecto de los niveles presentes en los sobrenadantes de PBMC, lo cual indicaría una retroalimentación positiva. Concluímos que el modelo de EG utilizando PBMC muestra niveles aumentados de osteoclastogénesis lo que podría contribuir a los problemas óseos presentes en la enfermedad y que uno de los mediadores responsables de dicho aumento sería la citoquina TNF-α . Por otro lado, también se observó que esta citoquina puede ser producida por los osteoclastos diferenciados dando lugar a un aumento en la osteoclastogénesis.