ESTUDIO DE LOS MECANISMOS FISIOPATOGENICOS ASOCIADOS A LA PATOLOGIA ÓSEA EN ENFERMEDAD DE GAUCHER.

MUCCI J. ; SUQUELI GARCIA M. ; DE FRANCESCO P. ; SCIAN R. ; FOSSATI C. ; DELPINO M. ; ROZENFELD P.

Mar del Plata

Congreso; LV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica , Reunión Sociedad Argentina de Fisiología 2010 y XLII Reunión Sociedad Argentina de Farmacología Experimental; 2010

La enfermedad de Gaucher (EG) es una patología genética de almacenamiento lisosomal, causada por la deficiencia de la enzima lisosomal beta-glucosidasa (GBA). Los aspectos esqueléticos en la EG incluyen alteraciones sintomáticas y radiológicas. En la EG se ha descripto un aumento en marcadores fenotípicos de resorción ósea mediada por osteoclastos tales como Catepsina K  o TRAP. Por otro lado, se sabe que la inflamación es un factor clave en la patogénesis de la EG. El objetivo de este trabajo es investigar el aumento de osteoclastogénesis en dos modelos in vitro de la EG, uno murino utilizando macrófagos de la línea J774 y uno humano mediante extracción de células mononucleares de sangre periférica. Los cultivos se realizaron en presencia de Conduritol β-epóxido (CBE), un inhibidor de la GBA, con el agregado de diferentes concentraciones de LPS y se midió la producción de IL-1β, TNF-α e IL-6 en los sobrenadantes mediante ELISA. Con estos sobrenadantes se trataron cultivos de precursores de médula ósea y se midió la inducción de osteoclastogénesis mediante la determinación de TRAP y MMP’s, y la expresión de los genes RANK, CTSK y CCL2 mediante qPCR. Se observó un aumento en la inducción de osteoclastogénesis para las células tratadas con CBE con respecto a los controles y un aumento aun mas marcado en presencia de LPS en ambos experimentos. En el caso de humanos las citoquinas se vieron aumentadas en presencia de CBE y LPS con respecto al control tratado con LPS. Para los ratones, en cambio, las mismas no presentaron diferencias apreciables entre tratamientos equivalentes. En la qPCR realizada para las muestras murinas no se aprecia un cambio significativo entre la condición control y la tratada con CBE. Como conclusión, ambos modelos exhiben un aumento en la inducción de osteoclastogénesis en presencia del inhibidor CBE con respecto a los controles. El modelo humano, a diferencia del murino, mostró una respuesta inflamatoria más acentuada.