?Diversidad de las plataformas Tn7 portadoras de integrones de clase 2? TL0833.

MASSÓ, MARIANA; PÁEZ, LAURA; GALÁN ANGÉLICA VIVIANA; ÁLVAREZ, VERÓNICA E.; CENTRÓN, DANIELA; QUIROGA, MARÍA PAULA

CABA

Congreso; XV Congreso Argentino de Microbiología (CAM 2019), XIV Congreso Argentino de Microbiología General (SAMIGE), V Congreso Argentino de Microbiología de Alimentos (V CAMA) y V Congreso Latinoamericano de Microbiología de Medicamentos y Cosméticos (CLAMME 201; 2019

Asociación Argentina de Microbiología

Introducción: Los transposones Tn7 y sus derivados Tn7-likeson reservorio de múltiples resistencias a antibióticos en bacterias debido aque algunos portan integrones de clase 2 (IC2). La transferencia horizontalgenética (THG) juega un rol principal en la dispersión de los IC2. En elpresente trabajo investigamos las plataformas genéticas de los transposones Tn7 y Tn7-like que diseminan IC2. Materiales y Métodos: Examinamos los transposones Tn7 depositados en GenBank que portabanIC2 y que poseían el módulo de transposición tnsABCDE completo. Clasificamos en alelos a los genes intI2, y tnsABCD a partir de alineamientos múltiples (Clustal) ydeterminamos las combinaciones que originaron las plataformas genéticasexistentes. Concatenamos los genes tnsABCDy utilizamos la herramienta MEGA para la reconstrucciónfilogenética mediante el algoritmo de Máxima Verosimilitud. La prueba defilogenia fue mediante el método de bootstrapcon 1000 réplicas. En aquellas plataformas invadidas por secuencias deinserción (IS), reconstruimos el alelo primitivo y posteriormente loconcatenamos de igual forma que el resto de las secuencias.Resultados: Agrupamos las plataformas en 14 categorías detransposones Tn7 (n=73) y 10 alelosintI2 (n=98). La variabilidad del módulo tnsABCDEestuvo dada principalmente por mutaciones en tnsD, que codifica para una proteína reguladora de latransposición. Tres categorías de Tn7mostraron mutaciones que afectan la funcionalidad respecto del Tn7 canónico. Observamos 2plataformas Tn7 que se diseminanactualmente, las de variantes TnsABCD_6 y TnsABCD_3, con genes intI2 no funcionales y representan el 84% de los registros. El TnsABCD_6(64%) se encontróen Shigella spp. (38,3%), E. coli (19,1%), Proteus mirabilis (10,6%), Acinetobacterbaumannii (8,5%), Providencia spp.(6,4%), Enterobacter cloacae (4,3%), Morganella morganii (4,3%), Oblitimonas alkaliphila (4,3%) y Pseudomonas aeruginosa (4,3%). En contraste,TNSABCD_3 se encontró alojado en Klebsiellapneumoniae exclusivamente (20%).Las zonas variables (ZV) de los IC2 llevan predominantemente el arreglo degenes cassette típico dfrA1-sat2-aadA1-orfX, aunque tambiénobservamos catB3-blaOXA-1-aacA4-orfX;dfrA1-ltrA (intrón del grupo II); blaIMP-27-sat1-spcR-orfX[PQ1] ;y ZV con genes cassettes noidentificados o gcu. Encontramosplataformas invadidas por IS3, IS4-like, IS5 e IS630. Finalmente, en cuantoal sitio de inserción del transposón Tn7,observamos preponderancia de la inserción cromosómica en el sitio attTn7.Conclusión: El estudio evolutivo mostró que las plataformas Tn7 de los clados más recientes llevan elarreglo canónico de tnsABCDE y portanvariantes IntI2 no funcionales, aunque detectamos clados basales con IntI2funcionales embebidas en Tn7-like. Estoindica que la dispersión de los IC2 embebidos en Tn7 se dio principalmente a partir de un ancestro común que portabaun IC2 con una integrasa IntI2 no funcional, sin embargo los mecanismosprecisos de la THG aún no se conocen completamente.