Estabilidad poblacional de Intrones grupo II clase C-attC: S.ma.I2 y Sh.sp.I4

ALONSO FM; PARMECIANO DI NOTO G; QUIROGA C; QUIROGA MP; CENTRON D

Mar del Plata

Congreso; IV Congreso Argentino de Microbiología Agrícola y Ambiental - I Jornada de Microbiología General; 2018

Asociación Argentina de Microbiología

Los intrones del Grupo II (GII)son elementos móviles con actividad ribozímica. Dentro de este grupo seencuentran los intrones de clase C-attC,los cuales comparten el sitio blanco de las integrasas de integrón que son lossitios de recombinación de los genes cassettes(attC). Estos intrones en particular,invaden los sitios attCs insertándoseen el inverse core site (ICS) de losmismos, reconociéndolos por su secuencia a nivel ADN así como también por suestructura secundaria. El objetivo de este trabajo fue caracterizar lapermanencia de los intrones del GII de clase C-attC en los genomas bacterianos. Para ello, se estudió elmantenimiento de 2 intrones de clase C-attC:S.ma.I2 y Sh.sp.I4, localizados enlos genomas de los aislamientos clínicos de Serratiamarcesens SCH909 y Shewanella sp.Sh95, respectivamente. Se partió de colonias individuales de cada aislamientoportador de un intrón y se realizaron subcultivos sucesivos diarios durante 30días en medio líquido Luria Bertani (LB) a 37ºC con agitación. A los días 7, 20y 30 se sembraron placas de LB agar a partir de los subcultivos y se realizóuna PCR a partir de 30 colonias mediante la técnica de hervido. Luego serealizaron reacciones de PCR con primersespecíficos para detectar la presencia de ambos intrones. Tanto el intrón S.ma.I2 como Sh.sp.I4 se mantuvieron en el 100% de las colonias analizadas hastalos 30 días de subcultivo. En función de estos resultados, se continuó elensayo con el intrón S.ma.I2 duranteseis meses, al cabo de los cuales se evidenció nuevamente su mantenimiento enel 100% de las colonias analizadas. Los resultados obtenidos indicarían queestos intrones se mantienen de forma estable en el genoma bacteriano una vezadquiridos. A partir de este sitio de invasión, estos intrones son susceptiblesde seguir diseminándose activamente mediante eventos de transferencia horizontalgenética gracias a su capacidad de movilización, pero principalmente por laacción de las integrasas de los integrones que contienen a los genes cassettes invadidos por intrones y porlos rangos de huésped de los plásmidos en los que suelen localizarse.