INVESTIGADORES
DIAZ RICCI Juan Carlos
congresos y reuniones científicas
Título:
Estudio del mecanismo de acción del extracto metanólico de Fragaria ananassa sobre bacterias patógenas humanas
Autor/es:
TORTORA, MA. LAURA; MAMANÍ DE MARCHESE, MA. ALICIA; FILIPPONE, PAULA; CASTAGNARO, ATILIO PEDRO; DIAZ RICCI, JUAN CARLOS
Lugar:
Tafí del Valle. Tucumán
Reunión:
Jornada; 22º Reunión de la Asociación de Biología de Tucumán; 2005
Institución organizadora:
Asociación de Biología de Tucumán
Resumen:
Las enfermedades infecciosas constituyen la primera causa de mortalidad a nivel mundial. El uso indiscriminado de antibióticos en el tratamiento de infecciones ha contribuido a la selección de microorganismos resistentes. La urgente necesidad de hacer frente a este problema ha llevado a investigadores y a la industria farmacéutica a buscar nuevas sustancias con actividad antimicrobiana. En este sentido, las plantas superiores constituyen una de las  fuentes más importantes de agentes quimioterápicos. En el INSIBIO se aislaron a partir de hojas de plantas sanas de frutilla, diferentes compuestos no proteicos con actividad antimicrobiana, denominados “Fragarinas”. El objetivo del presente trabajo es evaluar la acción bactericida, bacteriostática y/ o bacteriolítica del extracto metanólico de Fragaria ananassa cv Camarrosa frente a bacterias patógenas humanas Gram positivas y Gram negativas para una posible utilización farmacológica. El extracto se obtuvo a partir de hojas liofilizadas homogeneizadas en MeOH 80%, el solvente se eliminó en un evaporador rotatorio al vacío y el residuo se resuspendió en agua hasta la concentración deseada. Por el método de difusión en agar se determinó la concentración inhibitoria mínima (CIM) para la bacteria fitopatógena Clavibacter michiganensis utilizada como control positivo. Esta concentración fue la que posteriormente se utilizó para realizar los ensayos en medio líquido. Los microorganismos empleados en este ensayo fueron: Staphylococcus. aureus, Staphylococcus epidermidis, Escherichia coli y Salmonella newport, todos patógenos humanos. De un cultivo ON se realizó una dilución hasta obtener una DO600 de 0,1. Se incubó a 37 ºC hasta alcanzar una DO600 de 0,3, momento en el que se agregó el extracto en una concentración del 0,25% (p/v). Se continuó con la incubación a 37 ºC hasta completar las 7-8 horas de crecimiento, midiendo la DO600 cada hora y determinando el número de células viables (UFC/mL) a distintos tiempos. Para ello, se realizaron diluciones seriadas de los diferentes cultivos y el plaqueo correspondiente en placas de Petri. En la concentración ensayada el extracto no afectó el crecimiento ni la viabilidad de E. coli y S. newport,  mientras que en el caso de S. aureus y S. epidermidis se observó que inmediatamente después de agregado el extracto, la DO600 se mantuvo constante y los valores de UFC/mL disminuyeron cinco y tres órdenes de magnitud respectivamente. Para verificar la actividad bactericida del extracto metanólico sobre estas bacterias, una alícuota de cada uno de los cultivos, se sembró en un medio liquido enriquecido y se incubó en condiciones óptimas, luego de 12 horas de incubación no se observó crecimiento. Todas las bacterias mostraron una sensibilidad diferencial frente al extracto metanólico. El extracto presentó una fuerte actividad bactericida frente a las bacterias Gram positivas siendo S. aureus la bacteria más sensible. A la concentración ensayada no se observaron efectos sobre las bacterias Gram negativas. Según los resultados obtenidos, el extracto metanólico podría ser utilizado para el tratamiento de infecciones causadas por Staphylococcus sp. debido a su rápida acción bactericida y a su bajo costo.