Protección inducida por el elicitor AsES contra B. cinerea en plantas de A. thaliana

HAEL CONRAD, VERÓNICA; DÍAZ RICCI, JUAN C.; MÉTRAUX, JP; SERRANO, M

San Miguel de Tucumán

Simposio; X Simposio Nacional de Biotecnología REDBIO Argentina; 2015

REDBIO Argentina

ASES es unaproteína elicitora extracelular, que induce las defensas en plantas defrutilla; es producida por y purificada a partir de un aislado avirulento del hongopatógeno oportunista de frutilla Acremoniumstrictum. La aplicación foliar con AsES enfrutilla proporcionó una protección sistémica total contra el agente causantede antracnosis. Botrytis cinerea es un importante patógeno fúngico que causa pérdidas millonariasdurante pre- y post-cosecha de numerosos cultivos, por lo que ASES podría seruna opción biotecnológica adecuada para controlarlo. ASES se encuentra bajopatente nacional e internacional. El objetivo de este trabajo fue dilucidar el efectoy actividad de este nuevo elicitor contra B.cinerea en la planta modelo Arabidopsis thaliana. Se utilizaron plantas de A. thalianaecotipo Columbia-0 de 1 mes de edad, crecidas bajo condicionescontroladas de temperatura (diurna 20-22ºC; nocturna 16-18ºC), humedad relativa (HR,60?70%) y fotoperíodo (12 h de luz). Se trabajó con la cepa BMM de B. cinerea (5x104 conidios/ml), y se empleó el método de infección por gotas (10 μl dela suspensión de conidios o agua destilada para los controles). Para el tratamientode inducción de las plantas, se aplicó AsES o agua en forma de gotas y se lasmantuvo en cámaras herméticas bajo las mismas condiciones de crecimientodurante 48 h. Luego de la infección, las condiciones de incubación fueron las mismaspero en oscuridad. Para el ensayo de dosis-respuesta se trabajó conconcentraciones de 3, 30, 60, 150, 300 y 1500 nM, y se cuantificó el diámetrode la lesión (mm) a las 48 h post infección (hpi), y deposición de calosa; parael estudio de respuesta de defensa en el tiempo, se aplicó 60 nM de AsES y lossíntomas de la enfermedad se evaluaron a las 24, 48, 72 y 96 hpi. Finalmente seevaluó el crecimiento del patógeno in vitro e in vivo en presencia de AsES. AsEStiene un efecto dosis-dependiente; a la menor concentración ensayado no hubodefensa, y a mayores dosis, mayor protección, siendo 60 nM la dosis elegida encuanto a relación concentración-efecto, con una reducción de los síntomas deaproximadamente 50% con respecto a las plantas control. La deposición de calosatambién fue dosis-dependiente, observándose mayores depósitos a lasconcentraciones más altas, los cuales rodearon el punto inicial de infeccióncomo un posible mecanismo de defensa para controlar la diseminación delpatógeno. AsES mostró una protección temporal contra B. cinerea en A. thaliana durantelas primeras 72 hpi; la protección se perdió a las 96 hpi, pero las plantasinducidas mostraron lesiones menos profundas que las controles. El crecimientode B. cinerea en plantas inducidas con AsES fue semejante alobservado en plantas controles, así como el crecimiento in vitro enpresencia de dosis crecientes del elicitor. Estos resultados muestran que AsESejerce un efecto protector contra B.cinerea en A. thaliana, que es dosis-dependiente, temporal, y se deberíaa la inducción de las defensas de las plantas ya que no ejerce un efecto tóxicodirecto sobre el patógeno. Estos resultados son prometedores en vista dedesarrollar una estrategia biotecnológica para el control de B. cinerea.